CAJ | 학술논문

为建立一种可同时检测食品中弓形虫和旋毛虫的液相基因芯片方法,本研究以弓形虫B1基因和旋毛虫18S rDNA基因为靶序列,设计并合成特异性探针和引物,通过PCR方法扩增目的片段并测序,建立一种基于双重PCR的液相基因芯片检测方法.结果显示:在约180 bp和90 bp处分别扩增出目的条带;测序结果与GenBank登录的弓形虫和旋毛虫的相关基因一致性分别为99.47%和100%;液相基因芯片对单重PCR产物和双重PCR产物的检测结果一致,特异性和重复性良好.应用该方法检测弓形虫和旋毛虫变异系数(CV%)均在7%以内;灵敏度分别为65.6 ng/mL和39.06 ng/mL,比琼脂糖凝胶电泳灵敏高约8倍;模拟污染试验准确率达98%以上.本研究建立的液相基因芯片检测食品中弓形虫和旋毛虫的方法具有高效、灵敏和特异等优点,为食源性寄生虫的检测和监控提供了新方法.
위건립일충가동시검측식품중궁형충화선모충적액상기인심편방법,본연구이궁형충B1기인화선모충18S rDNA기인위파서렬,설계병합성특이성탐침화인물,통과PCR방법확증목적편단병측서,건립일충기우쌍중PCR적액상기인심편검측방법.결과현시:재약180 bp화90 bp처분별확증출목적조대;측서결과여GenBank등록적궁형충화선모충적상관기인일치성분별위99.47%화100%;액상기인심편대단중PCR산물화쌍중PCR산물적검측결과일치,특이성화중복성량호.응용해방법검측궁형충화선모충변이계수(CV%)균재7%이내;령민도분별위65.6 ng/mL화39.06 ng/mL,비경지당응효전영령민고약8배;모의오염시험준학솔체98%이상.본연구건립적액상기인심편검측식품중궁형충화선모충적방법구유고효、령민화특이등우점,위식원성기생충적검측화감공제공료신방법.