山东医药
山東醫藥
산동의약
SHANDONG MEDICAL JOURNAL
2010年
23期
10-12
,共3页
聚合酶链反应,实时性%重组病毒巨噬细胞炎症蛋白%人类免疫缺陷病毒-1前病毒载量
聚閤酶鏈反應,實時性%重組病毒巨噬細胞炎癥蛋白%人類免疫缺陷病毒-1前病毒載量
취합매련반응,실시성%중조병독거서세포염증단백%인류면역결함병독-1전병독재량
目的 建立SYBR Green I荧光定量PCR技术测定HIV-1前病毒载量方法,并以其观察相关病毒进入抑制剂对HIV-1前病毒的作用.方法 选择HIV-1的gag和env保守区域设计引物,建立SYBR Green I荧光定量PCR测定HIV-1前病毒载量的体系,并以其观察6 μg/ml～6 ng/ml的重组病毒巨噬细胞炎症蛋白(rvMIP)、逆转录酶抑制剂(AZT)、膜融合抑制剂(T-20)、rvMIP+AZT、rvMIP+T-20对HIV-1前病毒载量的影响.结果 所建立的荧光定量PCR体系的检测下限为101 Copies,其标准曲线的相关系数为0.998 9,斜率为-4.925,截距为35.70;除6 ng/ml的 rvMIP、AZT、T-20外,三种药物处理后HIV-1前病毒载量均显著减小(P<0.05),并呈质量浓度依赖性;联合用药者前病毒载量显著低于单用rvMIP者(P<0.05),HIV-1前病毒载量rvMIP+T-20 <rvMIP+AZT<rvMIP<T-20<AZT.结论 本研究建立的SYBR Green I荧光定量PCR检测方法具有灵敏、快速、准确及成本低廉等优点;与T-20或AZT联用可增强rvMIP对HIV-1前病毒的抑制作用.
目的 建立SYBR Green I熒光定量PCR技術測定HIV-1前病毒載量方法,併以其觀察相關病毒進入抑製劑對HIV-1前病毒的作用.方法 選擇HIV-1的gag和env保守區域設計引物,建立SYBR Green I熒光定量PCR測定HIV-1前病毒載量的體繫,併以其觀察6 μg/ml～6 ng/ml的重組病毒巨噬細胞炎癥蛋白(rvMIP)、逆轉錄酶抑製劑(AZT)、膜融閤抑製劑(T-20)、rvMIP+AZT、rvMIP+T-20對HIV-1前病毒載量的影響.結果 所建立的熒光定量PCR體繫的檢測下限為101 Copies,其標準麯線的相關繫數為0.998 9,斜率為-4.925,截距為35.70;除6 ng/ml的 rvMIP、AZT、T-20外,三種藥物處理後HIV-1前病毒載量均顯著減小(P<0.05),併呈質量濃度依賴性;聯閤用藥者前病毒載量顯著低于單用rvMIP者(P<0.05),HIV-1前病毒載量rvMIP+T-20 <rvMIP+AZT<rvMIP<T-20<AZT.結論 本研究建立的SYBR Green I熒光定量PCR檢測方法具有靈敏、快速、準確及成本低廉等優點;與T-20或AZT聯用可增彊rvMIP對HIV-1前病毒的抑製作用.
목적 건립SYBR Green I형광정량PCR기술측정HIV-1전병독재량방법,병이기관찰상관병독진입억제제대HIV-1전병독적작용.방법 선택HIV-1적gag화env보수구역설계인물,건립SYBR Green I형광정량PCR측정HIV-1전병독재량적체계,병이기관찰6 μg/ml～6 ng/ml적중조병독거서세포염증단백(rvMIP)、역전록매억제제(AZT)、막융합억제제(T-20)、rvMIP+AZT、rvMIP+T-20대HIV-1전병독재량적영향.결과 소건립적형광정량PCR체계적검측하한위101 Copies,기표준곡선적상관계수위0.998 9,사솔위-4.925,절거위35.70;제6 ng/ml적 rvMIP、AZT、T-20외,삼충약물처리후HIV-1전병독재량균현저감소(P<0.05),병정질량농도의뢰성;연합용약자전병독재량현저저우단용rvMIP자(P<0.05),HIV-1전병독재량rvMIP+T-20 <rvMIP+AZT<rvMIP<T-20<AZT.결론 본연구건립적SYBR Green I형광정량PCR검측방법구유령민、쾌속、준학급성본저렴등우점;여T-20혹AZT련용가증강rvMIP대HIV-1전병독적억제작용.
