河南科技学院学报（自然科学版）
河南科技學院學報（自然科學版）
하남과기학원학보（자연과학판）
JOURNAL OF HENAN INSTITUTE OF SCIENCE AND TECHNOLOGY(NATURAL SCIENCES EDITION)
2011年
3期
45-49
,共5页
谢凤珍%华承伟%陈晓静
謝鳳珍%華承偉%陳曉靜
사봉진%화승위%진효정
葡聚糖酶基因%大肠杆菌%表达%优化
葡聚糖酶基因%大腸桿菌%錶達%優化
포취당매기인%대장간균%표체%우화
拟青霉(Paecilomyces sp.FLH30)β-1，3(4)-葡聚糖酶可在重组菌BL21(DE3)-pET28a/PsBg16A中表达.首先确定了该酶的细胞表达定位，再研究了诱导温度、诱导剂种类及浓度、诱导起始菌体密度、诱导时间等因素对重组菌生长及目的蛋白表达活性的影响.结果表明，IPTG和乳糖皆可诱导目的蛋白表达，乳糖的诱导效果优于IPTG.在诱导起始0D600为3.2时加入10％乳糖，20℃诱导20 h最适于目的蛋白的表达.表达条件优化后，酶活可达到482.2U/mL.
擬青黴(Paecilomyces sp.FLH30)β-1，3(4)-葡聚糖酶可在重組菌BL21(DE3)-pET28a/PsBg16A中錶達.首先確定瞭該酶的細胞錶達定位，再研究瞭誘導溫度、誘導劑種類及濃度、誘導起始菌體密度、誘導時間等因素對重組菌生長及目的蛋白錶達活性的影響.結果錶明，IPTG和乳糖皆可誘導目的蛋白錶達，乳糖的誘導效果優于IPTG.在誘導起始0D600為3.2時加入10％乳糖，20℃誘導20 h最適于目的蛋白的錶達.錶達條件優化後，酶活可達到482.2U/mL.
의청매(Paecilomyces sp.FLH30)β-1，3(4)-포취당매가재중조균BL21(DE3)-pET28a/PsBg16A중표체.수선학정료해매적세포표체정위，재연구료유도온도、유도제충류급농도、유도기시균체밀도、유도시간등인소대중조균생장급목적단백표체활성적영향.결과표명，IPTG화유당개가유도목적단백표체，유당적유도효과우우IPTG.재유도기시0D600위3.2시가입10％유당，20℃유도20 h최괄우목적단백적표체.표체조건우화후，매활가체도482.2U/mL.
