中华流行病学杂志
中華流行病學雜誌
중화류행병학잡지
CHINESE JOURNAL OF EPIDEMIOLOGY
2006年
4期
347-350
,共4页
毛亚飞%林晓骥%李晶%阮萍%周晓辉%严杰
毛亞飛%林曉驥%李晶%阮萍%週曉輝%嚴傑
모아비%림효기%리정%원평%주효휘%엄걸
甲型副伤寒杆菌%spaO基因%原核表达%免疫原性/免疫保护
甲型副傷寒桿菌%spaO基因%原覈錶達%免疫原性/免疫保護
갑형부상한간균%spaO기인%원핵표체%면역원성/면역보호
目的研究甲型副伤寒杆菌spaO基因重组表达产物rSpaO免疫性和保护作用,并了解甲型副伤寒杆菌临床菌株spaO基因携带和表达情况.方法扩增并克隆甲型副伤寒杆菌临床株JH01 spaO基因,构建原核表达系统;采用SDS-PAGE分析rSpaO表达情况,Ni-NTA亲和层析法收集rSpaO,采用Western blot鉴定其免疫反应性;采用PCR和ELISA检测98株甲型副伤寒杆菌临床菌株spaO基因携带和表达频率;观察rSpaO对甲型副伤寒杆菌50001株感染小鼠的免疫保护作用.结果与报道的相关序列比较,克隆的spaO基因核苷酸和氨基酸序列同源性分别为99.45%~99.89%和99.01%~100%;rSpaO表达量为细菌总蛋白的75%左右;甲型副伤寒杆菌全菌抗血清能识别rSpaO;rSpaO免疫家兔可产生抗体;94.9%(93/98)甲型副伤寒杆菌临床菌株含有spaO基因,91.4%(85/93)spaO+菌株表达SpaO.rSpaO灌喂或皮下注射免疫小鼠(500μg)受甲型副伤寒杆菌50001株攻击后的存活率分别为58.3%和50.0%;若加入5μgrLTB,存活率分别上升88.3%和75.0%.结论甲型副伤寒杆菌临床菌株有较高的spaO基因携带率和表达率;rSpaO有良好的免疫原性和一定的免疫保护作用,可作为甲型副伤寒杆菌基因工程疫苗的候选抗原.
目的研究甲型副傷寒桿菌spaO基因重組錶達產物rSpaO免疫性和保護作用,併瞭解甲型副傷寒桿菌臨床菌株spaO基因攜帶和錶達情況.方法擴增併剋隆甲型副傷寒桿菌臨床株JH01 spaO基因,構建原覈錶達繫統;採用SDS-PAGE分析rSpaO錶達情況,Ni-NTA親和層析法收集rSpaO,採用Western blot鑒定其免疫反應性;採用PCR和ELISA檢測98株甲型副傷寒桿菌臨床菌株spaO基因攜帶和錶達頻率;觀察rSpaO對甲型副傷寒桿菌50001株感染小鼠的免疫保護作用.結果與報道的相關序列比較,剋隆的spaO基因覈苷痠和氨基痠序列同源性分彆為99.45%~99.89%和99.01%~100%;rSpaO錶達量為細菌總蛋白的75%左右;甲型副傷寒桿菌全菌抗血清能識彆rSpaO;rSpaO免疫傢兔可產生抗體;94.9%(93/98)甲型副傷寒桿菌臨床菌株含有spaO基因,91.4%(85/93)spaO+菌株錶達SpaO.rSpaO灌餵或皮下註射免疫小鼠(500μg)受甲型副傷寒桿菌50001株攻擊後的存活率分彆為58.3%和50.0%;若加入5μgrLTB,存活率分彆上升88.3%和75.0%.結論甲型副傷寒桿菌臨床菌株有較高的spaO基因攜帶率和錶達率;rSpaO有良好的免疫原性和一定的免疫保護作用,可作為甲型副傷寒桿菌基因工程疫苗的候選抗原.
목적연구갑형부상한간균spaO기인중조표체산물rSpaO면역성화보호작용,병료해갑형부상한간균림상균주spaO기인휴대화표체정황.방법확증병극륭갑형부상한간균림상주JH01 spaO기인,구건원핵표체계통;채용SDS-PAGE분석rSpaO표체정황,Ni-NTA친화층석법수집rSpaO,채용Western blot감정기면역반응성;채용PCR화ELISA검측98주갑형부상한간균림상균주spaO기인휴대화표체빈솔;관찰rSpaO대갑형부상한간균50001주감염소서적면역보호작용.결과여보도적상관서렬비교,극륭적spaO기인핵감산화안기산서렬동원성분별위99.45%~99.89%화99.01%~100%;rSpaO표체량위세균총단백적75%좌우;갑형부상한간균전균항혈청능식별rSpaO;rSpaO면역가토가산생항체;94.9%(93/98)갑형부상한간균림상균주함유spaO기인,91.4%(85/93)spaO+균주표체SpaO.rSpaO관위혹피하주사면역소서(500μg)수갑형부상한간균50001주공격후적존활솔분별위58.3%화50.0%;약가입5μgrLTB,존활솔분별상승88.3%화75.0%.결론갑형부상한간균림상균주유교고적spaO기인휴대솔화표체솔;rSpaO유량호적면역원성화일정적면역보호작용,가작위갑형부상한간균기인공정역묘적후선항원.