医药前沿
醫藥前沿
의약전연
YIAYAO QIANYAN
2012年
9期
147-148
,共2页
刘嬿%杨剑豪%郑皆炜%谢军华%孙瑛%杜可明
劉嬿%楊劍豪%鄭皆煒%謝軍華%孫瑛%杜可明
류연%양검호%정개위%사군화%손영%두가명
SBT%单链测序技术%PCR-SSO%PCR-SSP%HLA高分辨分型%中华骨髓库上海分库
SBT%單鏈測序技術%PCR-SSO%PCR-SSP%HLA高分辨分型%中華骨髓庫上海分庫
SBT%단련측서기술%PCR-SSO%PCR-SSP%HLA고분변분형%중화골수고상해분고
HLA 分型技术在骨髓库上海分库高分辨检测工作中的初步应用.方法:使用ABI3730xlDNA 测序仪,采用SBT 单链直接测序法,对上海地区的960 份自愿加入中华骨髓库的志愿者血液标本进行DNA 测序,其中HLA-I 类基因对第2,3 和4 外显子单链单向测序,II 类基因对第2 外显子单链单向测序,以得HLA 高分辨分型结果;对部分呈现血清学表达不一致的模棱两可高分辨结果标本,通过S S O 技术确认;对部分呈现血清学表达一致的模棱两可高分辨结果标本,通过SSP 或对2,3,4 以外的外显子单链检测作进一步确认.结果:960 份中华骨髓库上海分库的样本进行HLA 的PCR-SBT 高分检测,用DNA 单链测序法一次性获得高分辨结果为720 例;对部分呈现血清学表达一致的模棱两可高分辨结果标本,通过S S P 技术或2,3,4 以外的外显子单链检测做进一步确认,共计标本211 例;对于部分呈现血清学表达不一致的21 例模棱两可高分辨结果标本我们采用S S O 技术最终确认了唯一的高分结果;此外,还检测到待确认新基因4 例.完成了本次实验标本100%高分结果入库要求.结论:SBT 单链测序技术为主,PCR-SSO,PCR-SSP 联合为辅,是骨髓库开展HLA 高分辨分型工作的有力工具.
HLA 分型技術在骨髓庫上海分庫高分辨檢測工作中的初步應用.方法:使用ABI3730xlDNA 測序儀,採用SBT 單鏈直接測序法,對上海地區的960 份自願加入中華骨髓庫的誌願者血液標本進行DNA 測序,其中HLA-I 類基因對第2,3 和4 外顯子單鏈單嚮測序,II 類基因對第2 外顯子單鏈單嚮測序,以得HLA 高分辨分型結果;對部分呈現血清學錶達不一緻的模稜兩可高分辨結果標本,通過S S O 技術確認;對部分呈現血清學錶達一緻的模稜兩可高分辨結果標本,通過SSP 或對2,3,4 以外的外顯子單鏈檢測作進一步確認.結果:960 份中華骨髓庫上海分庫的樣本進行HLA 的PCR-SBT 高分檢測,用DNA 單鏈測序法一次性穫得高分辨結果為720 例;對部分呈現血清學錶達一緻的模稜兩可高分辨結果標本,通過S S P 技術或2,3,4 以外的外顯子單鏈檢測做進一步確認,共計標本211 例;對于部分呈現血清學錶達不一緻的21 例模稜兩可高分辨結果標本我們採用S S O 技術最終確認瞭唯一的高分結果;此外,還檢測到待確認新基因4 例.完成瞭本次實驗標本100%高分結果入庫要求.結論:SBT 單鏈測序技術為主,PCR-SSO,PCR-SSP 聯閤為輔,是骨髓庫開展HLA 高分辨分型工作的有力工具.
HLA 분형기술재골수고상해분고고분변검측공작중적초보응용.방법:사용ABI3730xlDNA 측서의,채용SBT 단련직접측서법,대상해지구적960 빈자원가입중화골수고적지원자혈액표본진행DNA 측서,기중HLA-I 류기인대제2,3 화4 외현자단련단향측서,II 류기인대제2 외현자단련단향측서,이득HLA 고분변분형결과;대부분정현혈청학표체불일치적모릉량가고분변결과표본,통과S S O 기술학인;대부분정현혈청학표체일치적모릉량가고분변결과표본,통과SSP 혹대2,3,4 이외적외현자단련검측작진일보학인.결과:960 빈중화골수고상해분고적양본진행HLA 적PCR-SBT 고분검측,용DNA 단련측서법일차성획득고분변결과위720 례;대부분정현혈청학표체일치적모릉량가고분변결과표본,통과S S P 기술혹2,3,4 이외적외현자단련검측주진일보학인,공계표본211 례;대우부분정현혈청학표체불일치적21 례모릉량가고분변결과표본아문채용S S O 기술최종학인료유일적고분결과;차외,환검측도대학인신기인4 례.완성료본차실험표본100%고분결과입고요구.결론:SBT 단련측서기술위주,PCR-SSO,PCR-SSP 연합위보,시골수고개전HLA 고분변분형공작적유력공구.
