天津医药
天津醫藥
천진의약
TIANJIN MEDICAL JOURNAL
2012年
4期
378-380,422
,共4页
闫永嘉%付蔚华%高莹%朱理玮
閆永嘉%付蔚華%高瑩%硃理瑋
염영가%부위화%고형%주리위
骨髓祖代细胞%慢病毒属%T淋巴细胞%免疫耐受%树突细胞%MHC-Ⅰ基因%小鼠,近交BALB C小鼠,近交C57BL%疾病模型,动物
骨髓祖代細胞%慢病毒屬%T淋巴細胞%免疫耐受%樹突細胞%MHC-Ⅰ基因%小鼠,近交BALB C小鼠,近交C57BL%疾病模型,動物
골수조대세포%만병독속%T림파세포%면역내수%수돌세포%MHC-Ⅰ기인%소서,근교BALB C소서,근교C57BL%질병모형,동물
目的:构建分子嵌合主要组织相容性复合体(MHC)-Ⅰ基因小鼠骨髓造血干细胞,并探讨其诱导脾脏T细胞对异基因小鼠树突状细胞(DC)反应的机制.方法:密度梯度法分离培养BALB/c小鼠骨髓造血干细胞.构建携带C57BL/6小鼠MHC-Ⅰ基因慢病毒载体(病毒感染组),携带无意义基因慢病毒载体(阴性对照组).分别感染BALB/c 小鼠骨髓造血干细胞,构建分子嵌合细胞.分别取病毒感染组、阴性对照组及未加入病毒的空白对照组造血干细胞输注BALB/c小鼠后7d,获取脾脏T淋巴细胞,分别与C57BL/6小鼠DC进行混合淋巴细胞培养,测定刺激指数.结果:成功体外分选及培养BALB/c小鼠骨髓造血干细胞.病毒感染组C57BL/6小鼠MHC-Ⅰ蛋白表达率可达98.17％.单向混合淋巴细胞培养结果显示,C57BL/6小鼠DC对输注病毒感染组细胞后BALB/c小鼠脾脏T细胞刺激指数明显降低(P＜0.01).结论:输注分子嵌合MHC-Ⅰ基因造血干细胞后,小鼠脾脏T细胞对异基因小鼠DC反应明显减低.
目的:構建分子嵌閤主要組織相容性複閤體(MHC)-Ⅰ基因小鼠骨髓造血榦細胞,併探討其誘導脾髒T細胞對異基因小鼠樹突狀細胞(DC)反應的機製.方法:密度梯度法分離培養BALB/c小鼠骨髓造血榦細胞.構建攜帶C57BL/6小鼠MHC-Ⅰ基因慢病毒載體(病毒感染組),攜帶無意義基因慢病毒載體(陰性對照組).分彆感染BALB/c 小鼠骨髓造血榦細胞,構建分子嵌閤細胞.分彆取病毒感染組、陰性對照組及未加入病毒的空白對照組造血榦細胞輸註BALB/c小鼠後7d,穫取脾髒T淋巴細胞,分彆與C57BL/6小鼠DC進行混閤淋巴細胞培養,測定刺激指數.結果:成功體外分選及培養BALB/c小鼠骨髓造血榦細胞.病毒感染組C57BL/6小鼠MHC-Ⅰ蛋白錶達率可達98.17％.單嚮混閤淋巴細胞培養結果顯示,C57BL/6小鼠DC對輸註病毒感染組細胞後BALB/c小鼠脾髒T細胞刺激指數明顯降低(P＜0.01).結論:輸註分子嵌閤MHC-Ⅰ基因造血榦細胞後,小鼠脾髒T細胞對異基因小鼠DC反應明顯減低.
목적:구건분자감합주요조직상용성복합체(MHC)-Ⅰ기인소서골수조혈간세포,병탐토기유도비장T세포대이기인소서수돌상세포(DC)반응적궤제.방법:밀도제도법분리배양BALB/c소서골수조혈간세포.구건휴대C57BL/6소서MHC-Ⅰ기인만병독재체(병독감염조),휴대무의의기인만병독재체(음성대조조).분별감염BALB/c 소서골수조혈간세포,구건분자감합세포.분별취병독감염조、음성대조조급미가입병독적공백대조조조혈간세포수주BALB/c소서후7d,획취비장T림파세포,분별여C57BL/6소서DC진행혼합림파세포배양,측정자격지수.결과:성공체외분선급배양BALB/c소서골수조혈간세포.병독감염조C57BL/6소서MHC-Ⅰ단백표체솔가체98.17％.단향혼합림파세포배양결과현시,C57BL/6소서DC대수주병독감염조세포후BALB/c소서비장T세포자격지수명현강저(P＜0.01).결론:수주분자감합MHC-Ⅰ기인조혈간세포후,소서비장T세포대이기인소서DC반응명현감저.
