工业微生物
工業微生物
공업미생물
INDUSTRIAL MICROBIOLOGY
2012年
2期
1-5
,共5页
重组%protein G%纯化%亲和常数
重組%protein G%純化%親和常數
중조%protein G%순화%친화상수
化学合成链球菌蛋白G的C3D基因片段,通过分子生物学的方法对蛋白G(proteinG)的C3[1]片段进行PCR扩增,拼接形成含有两个和三个重复C3片段的重组链球菌蛋白G,C3片段间以链接区D连接,即形成C3DC3和C3DC3DC3的形式,进而克隆到质粒pET21中,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达.重组表达的蛋白经过DEAE - Sepharose和IgG- Sepharose纯化,得到纯化的重组蛋白.采用非竞争性酶免疫法对重组蛋白与不同来源IgG的结合常数进行测定,实验结果显示两种重组链球菌蛋白G均可有效地与小鼠、兔及山羊等多种不同来源抗体特异性结合.这些实验结果为下一步研究奠定了基础.
化學閤成鏈毬菌蛋白G的C3D基因片段,通過分子生物學的方法對蛋白G(proteinG)的C3[1]片段進行PCR擴增,拼接形成含有兩箇和三箇重複C3片段的重組鏈毬菌蛋白G,C3片段間以鏈接區D連接,即形成C3DC3和C3DC3DC3的形式,進而剋隆到質粒pET21中,在大腸桿菌BL21(DE3)中錶達.重組錶達的蛋白經過DEAE - Sepharose和IgG- Sepharose純化,得到純化的重組蛋白.採用非競爭性酶免疫法對重組蛋白與不同來源IgG的結閤常數進行測定,實驗結果顯示兩種重組鏈毬菌蛋白G均可有效地與小鼠、兔及山羊等多種不同來源抗體特異性結閤.這些實驗結果為下一步研究奠定瞭基礎.
화학합성련구균단백G적C3D기인편단,통과분자생물학적방법대단백G(proteinG)적C3[1]편단진행PCR확증,병접형성함유량개화삼개중복C3편단적중조련구균단백G,C3편단간이련접구D련접,즉형성C3DC3화C3DC3DC3적형식,진이극륭도질립pET21중,재대장간균BL21(DE3)중표체.중조표체적단백경과DEAE - Sepharose화IgG- Sepharose순화,득도순화적중조단백.채용비경쟁성매면역법대중조단백여불동래원IgG적결합상수진행측정,실험결과현시량충중조련구균단백G균가유효지여소서、토급산양등다충불동래원항체특이성결합.저사실험결과위하일보연구전정료기출.
