云南中医学院学报
雲南中醫學院學報
운남중의학원학보
JOURNAL OF YUNNAN COLLEGE OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE
2011年
6期
7-10
,共4页
胡黄连%SRAP%引物筛选
鬍黃連%SRAP%引物篩選
호황련%SRAP%인물사선
目的:建立胡黄连SRAP的反应体系,并筛选出适合胡黄连的引物组合,为胡黄连的遗传多样性研究奠定基础.方法:采用5因素(dNTP、Mg2+、Taq酶、引物、DNA)4水平正交试验一步法建立SRAP -PCR的反应体系,采用梯度温度法筛选PCR反应程序的最佳退火温度,对已发表的SRAP引物组合进行了筛选.结果:胡黄连SRAP - PCR的最佳反应体系,即20μL反应体系:10×buffer 2μL,dNTP 150μmol·L-1,Mg23 mmol·L-1,Taq酶2U,引物为0.5μmol·L-1,DNA为20ng,DMSO 1μL;最适的退火温度是30.0℃~33.2℃:最适的引物组合为Me1Em1,Me1Em2,Me1Em3,Me3Em3,Me1Em4,Me2Em4,Me3Em4,Me4Em4,Me1Em5,Me3Em5,Me4Em5,Me3Em6,Me4Em6.结论:该体系是适合胡黄连SRAP - PCR反应的最适宜体系,为今后胡黄连遗传多样性研究奠定了基础.
目的:建立鬍黃連SRAP的反應體繫,併篩選齣適閤鬍黃連的引物組閤,為鬍黃連的遺傳多樣性研究奠定基礎.方法:採用5因素(dNTP、Mg2+、Taq酶、引物、DNA)4水平正交試驗一步法建立SRAP -PCR的反應體繫,採用梯度溫度法篩選PCR反應程序的最佳退火溫度,對已髮錶的SRAP引物組閤進行瞭篩選.結果:鬍黃連SRAP - PCR的最佳反應體繫,即20μL反應體繫:10×buffer 2μL,dNTP 150μmol·L-1,Mg23 mmol·L-1,Taq酶2U,引物為0.5μmol·L-1,DNA為20ng,DMSO 1μL;最適的退火溫度是30.0℃~33.2℃:最適的引物組閤為Me1Em1,Me1Em2,Me1Em3,Me3Em3,Me1Em4,Me2Em4,Me3Em4,Me4Em4,Me1Em5,Me3Em5,Me4Em5,Me3Em6,Me4Em6.結論:該體繫是適閤鬍黃連SRAP - PCR反應的最適宜體繫,為今後鬍黃連遺傳多樣性研究奠定瞭基礎.
목적:건립호황련SRAP적반응체계,병사선출괄합호황련적인물조합,위호황련적유전다양성연구전정기출.방법:채용5인소(dNTP、Mg2+、Taq매、인물、DNA)4수평정교시험일보법건립SRAP -PCR적반응체계,채용제도온도법사선PCR반응정서적최가퇴화온도,대이발표적SRAP인물조합진행료사선.결과:호황련SRAP - PCR적최가반응체계,즉20μL반응체계:10×buffer 2μL,dNTP 150μmol·L-1,Mg23 mmol·L-1,Taq매2U,인물위0.5μmol·L-1,DNA위20ng,DMSO 1μL;최괄적퇴화온도시30.0℃~33.2℃:최괄적인물조합위Me1Em1,Me1Em2,Me1Em3,Me3Em3,Me1Em4,Me2Em4,Me3Em4,Me4Em4,Me1Em5,Me3Em5,Me4Em5,Me3Em6,Me4Em6.결론:해체계시괄합호황련SRAP - PCR반응적최괄의체계,위금후호황련유전다양성연구전정료기출.