中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2012年
1期
47-52
,共6页
刘培%邵铁梅%卢海刚%柴锡庆%高维娟%安胜军
劉培%邵鐵梅%盧海剛%柴錫慶%高維娟%安勝軍
류배%소철매%로해강%시석경%고유연%안성군
成纤维细胞%亚群%克隆环法%血管紧张素II
成纖維細胞%亞群%剋隆環法%血管緊張素II
성섬유세포%아군%극륭배법%혈관긴장소II
目的:体外分离培养SD大鼠胸主动脉外膜成纤维细胞亚群,并对其增殖特性和血管功能进行初步分析.方法:克隆环法进行血管外膜成纤维细胞的单克隆培养,RT-PCR鉴定细胞亚群纯度,MTT检测血管外膜成纤维细胞亚群增殖能力.荧光定量PCR检测血管紧张素 II(Ang II)及其受体拮抗剂氯沙坦(losartan)和PD-123319对前内皮素原-1(preproET-1)mRNA表达的影响.结果:克隆环法获得血管外膜成纤维细胞2个亚群:圆形细胞亚群和纺锤形细胞亚群.以β-肌动蛋白(β-actin)为内参照,经RT-PCR检测,结果显示无von Willebrand因子、CD8、结蛋白和肌球蛋白重链的表达,是纯细胞系.2个细胞亚群的增殖情况有所不同,圆形细胞在第2～4 d进入指数分裂期;纺锤形细胞于第3～5 d进入指数分裂期.Ang II在0~1 000 nmol/L范围内对纺锤形细胞preproET-1 mRNA的表达无显著影响,而呈浓度依赖性地增加圆形细胞preproET-1 mRNA的表达(P<0.01);losartan阻断了Ang II诱导的圆形细胞preproET-1 mRNA的表达,但对纺锤形细胞preproET-1 mRNA的表达无明显影响.结论:SD大鼠血管外膜成纤维细胞有2个细胞亚群:圆形细胞和纺锤形细胞,其生长特性略有不同.Ang II显著促进圆形细胞preproET-1 mRNA的表达,提示这2个细胞亚群可能在血管重建和修复过程中发挥不同作用.
目的:體外分離培養SD大鼠胸主動脈外膜成纖維細胞亞群,併對其增殖特性和血管功能進行初步分析.方法:剋隆環法進行血管外膜成纖維細胞的單剋隆培養,RT-PCR鑒定細胞亞群純度,MTT檢測血管外膜成纖維細胞亞群增殖能力.熒光定量PCR檢測血管緊張素 II(Ang II)及其受體拮抗劑氯沙坦(losartan)和PD-123319對前內皮素原-1(preproET-1)mRNA錶達的影響.結果:剋隆環法穫得血管外膜成纖維細胞2箇亞群:圓形細胞亞群和紡錘形細胞亞群.以β-肌動蛋白(β-actin)為內參照,經RT-PCR檢測,結果顯示無von Willebrand因子、CD8、結蛋白和肌毬蛋白重鏈的錶達,是純細胞繫.2箇細胞亞群的增殖情況有所不同,圓形細胞在第2～4 d進入指數分裂期;紡錘形細胞于第3～5 d進入指數分裂期.Ang II在0~1 000 nmol/L範圍內對紡錘形細胞preproET-1 mRNA的錶達無顯著影響,而呈濃度依賴性地增加圓形細胞preproET-1 mRNA的錶達(P<0.01);losartan阻斷瞭Ang II誘導的圓形細胞preproET-1 mRNA的錶達,但對紡錘形細胞preproET-1 mRNA的錶達無明顯影響.結論:SD大鼠血管外膜成纖維細胞有2箇細胞亞群:圓形細胞和紡錘形細胞,其生長特性略有不同.Ang II顯著促進圓形細胞preproET-1 mRNA的錶達,提示這2箇細胞亞群可能在血管重建和脩複過程中髮揮不同作用.
목적:체외분리배양SD대서흉주동맥외막성섬유세포아군,병대기증식특성화혈관공능진행초보분석.방법:극륭배법진행혈관외막성섬유세포적단극륭배양,RT-PCR감정세포아군순도,MTT검측혈관외막성섬유세포아군증식능력.형광정량PCR검측혈관긴장소 II(Ang II)급기수체길항제록사탄(losartan)화PD-123319대전내피소원-1(preproET-1)mRNA표체적영향.결과:극륭배법획득혈관외막성섬유세포2개아군:원형세포아군화방추형세포아군.이β-기동단백(β-actin)위내삼조,경RT-PCR검측,결과현시무von Willebrand인자、CD8、결단백화기구단백중련적표체,시순세포계.2개세포아군적증식정황유소불동,원형세포재제2～4 d진입지수분렬기;방추형세포우제3～5 d진입지수분렬기.Ang II재0~1 000 nmol/L범위내대방추형세포preproET-1 mRNA적표체무현저영향,이정농도의뢰성지증가원형세포preproET-1 mRNA적표체(P<0.01);losartan조단료Ang II유도적원형세포preproET-1 mRNA적표체,단대방추형세포preproET-1 mRNA적표체무명현영향.결론:SD대서혈관외막성섬유세포유2개세포아군:원형세포화방추형세포,기생장특성략유불동.Ang II현저촉진원형세포preproET-1 mRNA적표체,제시저2개세포아군가능재혈관중건화수복과정중발휘불동작용.
