中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2011年
8期
625-629
,共5页
毕振威%王永山%范红结%王智群%吴晓悠%马金荣%欧阳伟%张海彬
畢振威%王永山%範紅結%王智群%吳曉悠%馬金榮%歐暘偉%張海彬
필진위%왕영산%범홍결%왕지군%오효유%마금영%구양위%장해빈
犬瘟热病毒%非典型%核衣壳蛋白基因%序列分析%原核表达
犬瘟熱病毒%非典型%覈衣殼蛋白基因%序列分析%原覈錶達
견온열병독%비전형%핵의각단백기인%서렬분석%원핵표체
为分析当地非典型犬瘟热病毒(CDV)核衣壳蛋白(N)基因的序列特征及其表达产物的抗原性,根据已发表CDV的N基因序列设计引物,用RT-PCR方法从引起非典型症状的CDV细胞培养物中扩增N基因,进行克隆和序列分析,结果表明:该非典型CDV的N基因与已发表的12个CDV强毒株的核苷酸序列和氨基酸序列同源性分别在96.6％～99.2％和97.9％～99.4％之间,与已发表的4个CDV疫苗弱毒株的同源性分别在93.2％～93.6％和96.4％～97.5％之间；在N基因系统发育进化树上,非典型CDV与12个强毒株处在同一亚群,而且与9个中国分离毒株的亲缘关系近于3个国外毒株.N基因在大肠杆菌中表达的重组N蛋白的分子量为62ku,主要以包涵体的形式存在；用westem blot分析,重组N蛋白可与CDV阳性血清发生特异性反应；以纯化的重组N蛋白为抗原建立的CDV抗体间接ELISA检测方法具有良好的特异性.
為分析噹地非典型犬瘟熱病毒(CDV)覈衣殼蛋白(N)基因的序列特徵及其錶達產物的抗原性,根據已髮錶CDV的N基因序列設計引物,用RT-PCR方法從引起非典型癥狀的CDV細胞培養物中擴增N基因,進行剋隆和序列分析,結果錶明:該非典型CDV的N基因與已髮錶的12箇CDV彊毒株的覈苷痠序列和氨基痠序列同源性分彆在96.6％～99.2％和97.9％～99.4％之間,與已髮錶的4箇CDV疫苗弱毒株的同源性分彆在93.2％～93.6％和96.4％～97.5％之間；在N基因繫統髮育進化樹上,非典型CDV與12箇彊毒株處在同一亞群,而且與9箇中國分離毒株的親緣關繫近于3箇國外毒株.N基因在大腸桿菌中錶達的重組N蛋白的分子量為62ku,主要以包涵體的形式存在；用westem blot分析,重組N蛋白可與CDV暘性血清髮生特異性反應；以純化的重組N蛋白為抗原建立的CDV抗體間接ELISA檢測方法具有良好的特異性.
위분석당지비전형견온열병독(CDV)핵의각단백(N)기인적서렬특정급기표체산물적항원성,근거이발표CDV적N기인서렬설계인물,용RT-PCR방법종인기비전형증상적CDV세포배양물중확증N기인,진행극륭화서렬분석,결과표명:해비전형CDV적N기인여이발표적12개CDV강독주적핵감산서렬화안기산서렬동원성분별재96.6％～99.2％화97.9％～99.4％지간,여이발표적4개CDV역묘약독주적동원성분별재93.2％～93.6％화96.4％～97.5％지간；재N기인계통발육진화수상,비전형CDV여12개강독주처재동일아군,이차여9개중국분리독주적친연관계근우3개국외독주.N기인재대장간균중표체적중조N단백적분자량위62ku,주요이포함체적형식존재；용westem blot분석,중조N단백가여CDV양성혈청발생특이성반응；이순화적중조N단백위항원건립적CDV항체간접ELISA검측방법구유량호적특이성.
