安徽医科大学学报
安徽醫科大學學報
안휘의과대학학보
ACTA UNIVERSITY MEDICINALIS ANHUI
2011年
9期
853-857
,共5页
王志成%张晓峰%陈晓宇%戴克胜
王誌成%張曉峰%陳曉宇%戴剋勝
왕지성%장효봉%진효우%대극성
血小板%线粒体%细胞凋亡%他莫昔芬
血小闆%線粒體%細胞凋亡%他莫昔芬
혈소판%선립체%세포조망%타막석분
目的 探讨三苯氧胺(TAM)诱导血小板凋亡作用及其分子机制.方法 取健康志愿者静脉血,分离得到富含血小板血浆(PRP)和洗涤血小板,血小板与不同浓度TAM孵育后,流式细胞仪检测磷脂酰丝氨酸(PS)暴露、线粒体跨膜电位(ΔΨm)去极化、胞质Ca2+浓度;Western blot检测活化的caspase-3和gelsolin酶解产物.在抑制实验中,血小板先与线粒体通透性转换孔(MPTP)抑制剂环孢素-A(Cyp-A)或二甲基亚砜(DMSO)预孵育,然后再与TAM孵育,流式细胞仪和Western blot检测凋亡标志物.结果 TAM浓度依赖地诱导血小板PS暴露、ΔΨm去极化、胞质Ca2+浓度增加和活化的caspase-3.Cyp-A抑制TAM诱导的PS暴露、ΔΨm去极化和caspase-3活化,但不抑制胞质Ca2+浓度升高.结论 TAM能够诱导血小板发生凋亡,MPTP在TAM诱导的血小板凋亡中可能起关键作用
目的 探討三苯氧胺(TAM)誘導血小闆凋亡作用及其分子機製.方法 取健康誌願者靜脈血,分離得到富含血小闆血漿(PRP)和洗滌血小闆,血小闆與不同濃度TAM孵育後,流式細胞儀檢測燐脂酰絲氨痠(PS)暴露、線粒體跨膜電位(ΔΨm)去極化、胞質Ca2+濃度;Western blot檢測活化的caspase-3和gelsolin酶解產物.在抑製實驗中,血小闆先與線粒體通透性轉換孔(MPTP)抑製劑環孢素-A(Cyp-A)或二甲基亞砜(DMSO)預孵育,然後再與TAM孵育,流式細胞儀和Western blot檢測凋亡標誌物.結果 TAM濃度依賴地誘導血小闆PS暴露、ΔΨm去極化、胞質Ca2+濃度增加和活化的caspase-3.Cyp-A抑製TAM誘導的PS暴露、ΔΨm去極化和caspase-3活化,但不抑製胞質Ca2+濃度升高.結論 TAM能夠誘導血小闆髮生凋亡,MPTP在TAM誘導的血小闆凋亡中可能起關鍵作用
목적 탐토삼분양알(TAM)유도혈소판조망작용급기분자궤제.방법 취건강지원자정맥혈,분리득도부함혈소판혈장(PRP)화세조혈소판,혈소판여불동농도TAM부육후,류식세포의검측린지선사안산(PS)폭로、선립체과막전위(ΔΨm)거겁화、포질Ca2+농도;Western blot검측활화적caspase-3화gelsolin매해산물.재억제실험중,혈소판선여선립체통투성전환공(MPTP)억제제배포소-A(Cyp-A)혹이갑기아풍(DMSO)예부육,연후재여TAM부육,류식세포의화Western blot검측조망표지물.결과 TAM농도의뢰지유도혈소판PS폭로、ΔΨm거겁화、포질Ca2+농도증가화활화적caspase-3.Cyp-A억제TAM유도적PS폭로、ΔΨm거겁화화caspase-3활화,단불억제포질Ca2+농도승고.결론 TAM능구유도혈소판발생조망,MPTP재TAM유도적혈소판조망중가능기관건작용