植物保护
植物保護
식물보호
PLANT PROTECTION
2010年
6期
21-25
,共5页
张正英%令利军%王红梅%李淑洁%李静雯
張正英%令利軍%王紅梅%李淑潔%李靜雯
장정영%령리군%왕홍매%리숙길%리정문
同源克隆%半夏凝集素基因(pta)%表达载体构建%蚜虫抗性
同源剋隆%半夏凝集素基因(pta)%錶達載體構建%蚜蟲抗性
동원극륭%반하응집소기인(pta)%표체재체구건%아충항성
采用同源序列克隆方法,通过设计特异性引物从甘肃西和半夏叶片基因组DNA中克隆到1条1 069 bp的半夏凝集素基因pta,与以同科内植物的mRNA为模板扩增得到的凝集素基因序列的同源性很高,达到98%以上,功能区完整,具有1条信号肽和3个甘露糖结合区,GenBank登录号AY725425.用该基因替换pBI121载体的GUS基因,正向插入35S启动子之下,构建了植物表达载体pBI-pta.通过农杆菌介导法转化烟草,从20株Kan抗性植株中得到PCR检测阳性植株14株,证明pta已整合到烟草基因组中.对随机挑取的7株PCR阳性植株进行了抗蚜虫(Myzus persicae)筛选试验,结果表明:不同株系蚜口密度抑制率在22.5%～89.4%,平均蚜口密度抑制率56.2%.
採用同源序列剋隆方法,通過設計特異性引物從甘肅西和半夏葉片基因組DNA中剋隆到1條1 069 bp的半夏凝集素基因pta,與以同科內植物的mRNA為模闆擴增得到的凝集素基因序列的同源性很高,達到98%以上,功能區完整,具有1條信號肽和3箇甘露糖結閤區,GenBank登錄號AY725425.用該基因替換pBI121載體的GUS基因,正嚮插入35S啟動子之下,構建瞭植物錶達載體pBI-pta.通過農桿菌介導法轉化煙草,從20株Kan抗性植株中得到PCR檢測暘性植株14株,證明pta已整閤到煙草基因組中.對隨機挑取的7株PCR暘性植株進行瞭抗蚜蟲(Myzus persicae)篩選試驗,結果錶明:不同株繫蚜口密度抑製率在22.5%～89.4%,平均蚜口密度抑製率56.2%.
채용동원서렬극륭방법,통과설계특이성인물종감숙서화반하협편기인조DNA중극륭도1조1 069 bp적반하응집소기인pta,여이동과내식물적mRNA위모판확증득도적응집소기인서렬적동원성흔고,체도98%이상,공능구완정,구유1조신호태화3개감로당결합구,GenBank등록호AY725425.용해기인체환pBI121재체적GUS기인,정향삽입35S계동자지하,구건료식물표체재체pBI-pta.통과농간균개도법전화연초,종20주Kan항성식주중득도PCR검측양성식주14주,증명pta이정합도연초기인조중.대수궤도취적7주PCR양성식주진행료항아충(Myzus persicae)사선시험,결과표명:불동주계아구밀도억제솔재22.5%～89.4%,평균아구밀도억제솔56.2%.
