基因组学与应用生物学
基因組學與應用生物學
기인조학여응용생물학
GENOMICS AND APPLIED BIOLOGY
2010年
4期
658-664
,共7页
吴威%郑经成%闫广谋%王思洮%盛相鹏%胡丹%张阳阳%韩文瑜
吳威%鄭經成%閆廣謀%王思洮%盛相鵬%鬍丹%張暘暘%韓文瑜
오위%정경성%염엄모%왕사조%성상붕%호단%장양양%한문유
蜡样芽孢杆菌%plcR基因%tfdA基因%同源重组
蠟樣芽孢桿菌%plcR基因%tfdA基因%同源重組
사양아포간균%plcR기인%tfdA기인%동원중조
蜡样芽孢杆菌是土壤中的优势菌,具有作为益生菌的潜在能力,同时它也是条件致病菌,能引起食物中毒等.蜡样芽孢杆菌的多种毒力因子受到多效性调控子(pleiotropic regulator,plcR)的调控,在其条件致病性作用中起着重要作用.真养产碱杆菌JMP34(Alcaligelles eutrophus)质粒上的2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-dichlorophenoxyacetic acid,2,4-D)单加氧酶(tfdA)基因可以降解2,4-D.本研究利用同源重组技术使tfdA基因置换掉蜡样芽孢杆菌的plcR基因,构建了蜡样芽孢杆菌ATCC14579突变株B.cereus ΔplcRΩtf-dA,并对其毒性、一般生理生化特性进行分析.研究结果表明,突变株B.cereus ΔplcRΩtfdA的毒性显著减弱;生理生化实验结果显示突变株与野生株并没有明显区别,且突变株并没有表现出tfdA酶活性.所有的结果表明plcR控制着蜡样芽孢杆菌ATCC14579的致病性,同时剔除plcR并不破坏其酶系统.本研究为今后构建蜡样芽孢杆菌工程菌提供了新的思路和依据.
蠟樣芽孢桿菌是土壤中的優勢菌,具有作為益生菌的潛在能力,同時它也是條件緻病菌,能引起食物中毒等.蠟樣芽孢桿菌的多種毒力因子受到多效性調控子(pleiotropic regulator,plcR)的調控,在其條件緻病性作用中起著重要作用.真養產堿桿菌JMP34(Alcaligelles eutrophus)質粒上的2,4-二氯苯氧乙痠(2,4-dichlorophenoxyacetic acid,2,4-D)單加氧酶(tfdA)基因可以降解2,4-D.本研究利用同源重組技術使tfdA基因置換掉蠟樣芽孢桿菌的plcR基因,構建瞭蠟樣芽孢桿菌ATCC14579突變株B.cereus ΔplcRΩtf-dA,併對其毒性、一般生理生化特性進行分析.研究結果錶明,突變株B.cereus ΔplcRΩtfdA的毒性顯著減弱;生理生化實驗結果顯示突變株與野生株併沒有明顯區彆,且突變株併沒有錶現齣tfdA酶活性.所有的結果錶明plcR控製著蠟樣芽孢桿菌ATCC14579的緻病性,同時剔除plcR併不破壞其酶繫統.本研究為今後構建蠟樣芽孢桿菌工程菌提供瞭新的思路和依據.
사양아포간균시토양중적우세균,구유작위익생균적잠재능력,동시타야시조건치병균,능인기식물중독등.사양아포간균적다충독력인자수도다효성조공자(pleiotropic regulator,plcR)적조공,재기조건치병성작용중기착중요작용.진양산감간균JMP34(Alcaligelles eutrophus)질립상적2,4-이록분양을산(2,4-dichlorophenoxyacetic acid,2,4-D)단가양매(tfdA)기인가이강해2,4-D.본연구이용동원중조기술사tfdA기인치환도사양아포간균적plcR기인,구건료사양아포간균ATCC14579돌변주B.cereus ΔplcRΩtf-dA,병대기독성、일반생리생화특성진행분석.연구결과표명,돌변주B.cereus ΔplcRΩtfdA적독성현저감약;생리생화실험결과현시돌변주여야생주병몰유명현구별,차돌변주병몰유표현출tfdA매활성.소유적결과표명plcR공제착사양아포간균ATCC14579적치병성,동시척제plcR병불파배기매계통.본연구위금후구건사양아포간균공정균제공료신적사로화의거.
