生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2009年
4期
523-525,579
,共4页
于永生%罗晓彤%吴晓洁%周艳荣%陈红星%邓继先
于永生%囉曉彤%吳曉潔%週豔榮%陳紅星%鄧繼先
우영생%라효동%오효길%주염영%진홍성%산계선
人尿激酶原突变体%乳腺特异表达%慢病毒载体
人尿激酶原突變體%乳腺特異錶達%慢病毒載體
인뇨격매원돌변체%유선특이표체%만병독재체
目的:构建山羊乳腺特异性表达尿激酶原突变体的重组慢病毒载体,证明其表达的有效性.方法:将劳氏肉瘤病毒增强子/启动子、复制缺陷型人免疫缺陷病毒(HIV-1)的5'端长重复序列(LTR)、HIV-1包装信号、HIV Bey反应元件、山羊β-酪蛋白调控序列、尿激酶原M13 cDNA、AU3/3'LTB、牛生长激素(BGH)基因poly(A)依次连接,构建乳腺特异性表达的慢病毒载体.通过体外转染人乳腺癌细胞系MCF-7、中国仓鼠卵巢细胞及泌乳山羊乳腺注射证明其表达有效性.结果:酶切鉴定证实山羊乳腺特异性表达载体构建正确;将该载体转染细胞,采用溶圈法和Western印迹检测证实了其表达的有效性;慢病毒载体注射到泌乳山羊的乳腺,在乳汁中也检测到了尿激酶原的表达.结论:为在转基因动物乳腺中表达尿激酶原突变体奠定了基础.
目的:構建山羊乳腺特異性錶達尿激酶原突變體的重組慢病毒載體,證明其錶達的有效性.方法:將勞氏肉瘤病毒增彊子/啟動子、複製缺陷型人免疫缺陷病毒(HIV-1)的5'耑長重複序列(LTR)、HIV-1包裝信號、HIV Bey反應元件、山羊β-酪蛋白調控序列、尿激酶原M13 cDNA、AU3/3'LTB、牛生長激素(BGH)基因poly(A)依次連接,構建乳腺特異性錶達的慢病毒載體.通過體外轉染人乳腺癌細胞繫MCF-7、中國倉鼠卵巢細胞及泌乳山羊乳腺註射證明其錶達有效性.結果:酶切鑒定證實山羊乳腺特異性錶達載體構建正確;將該載體轉染細胞,採用溶圈法和Western印跡檢測證實瞭其錶達的有效性;慢病毒載體註射到泌乳山羊的乳腺,在乳汁中也檢測到瞭尿激酶原的錶達.結論:為在轉基因動物乳腺中錶達尿激酶原突變體奠定瞭基礎.
목적:구건산양유선특이성표체뇨격매원돌변체적중조만병독재체,증명기표체적유효성.방법:장로씨육류병독증강자/계동자、복제결함형인면역결함병독(HIV-1)적5'단장중복서렬(LTR)、HIV-1포장신호、HIV Bey반응원건、산양β-락단백조공서렬、뇨격매원M13 cDNA、AU3/3'LTB、우생장격소(BGH)기인poly(A)의차련접,구건유선특이성표체적만병독재체.통과체외전염인유선암세포계MCF-7、중국창서란소세포급비유산양유선주사증명기표체유효성.결과:매절감정증실산양유선특이성표체재체구건정학;장해재체전염세포,채용용권법화Western인적검측증실료기표체적유효성;만병독재체주사도비유산양적유선,재유즙중야검측도료뇨격매원적표체.결론:위재전기인동물유선중표체뇨격매원돌변체전정료기출.
