CAJ | 학술논문

目的:探讨Egr-1基因在吗啡慢性处理或吗啡戒断细胞中的表达以及在吗啡成瘾过程中的作用.方法:分别用浓度为0、1、10、100和1000 μmol/L的吗啡和0、0.01、0.1、1和10 μmol/L纳洛酮急性处理PC12细胞,1h后Egr-1蛋白免疫荧光染色.吗啡慢性处理实验分4组,A组,B组、C组和D组.C组和D组细胞加入100 μmol/L吗啡,培养48h,A组和B组仅加入同体积0.9%氯化钠.48h后B组和D组给予10 μmol/L纳洛酮拮抗,A组和C组加入同体积0.9%氯化钠.在纳洛酮拮抗后1、2、4、8和24h,Egr-1蛋白免疫荧光染色;用MTT比色法观察各组PC12细胞的损害,并用FITC-Annexin Ⅴ/PI流式凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡率.结果:0～100 μmol/L吗啡及各浓度的纳洛酮作用下细胞未见明显Egr-1阳性染色,而1000 μmoL/L时有少量阳性染色细胞.D组在纳洛酮戒断后1 h即出现Egr-1蛋白阳性染色并持续24 h,并在12 h时可见部分细胞折光性能力减弱,细胞中颗粒增多,核固缩并断裂成数个等.C组仅有少许细胞出现Egr-1阳性染色.与A组相比较,C组细胞生存率下降,并在12 h和24 h时差异有统计学意义;而D组生存率则进一步下降,与A组和C组相比差异有统计学意义.FITC-Annexin Ⅴ/PI流式凋亡检测到C组细胞凋亡8.42±2.09%,D组细胞凋亡率则增加到37.62±7.19%.结论:吗啡慢性处理或吗啡慢戒断后出现Egr-1基因表达增加和细胞凋亡,而Egr-1基因的表达增加和细胞凋亡可能参与吗啡成瘾机制.
목적:탐토Egr-1기인재마배만성처리혹마배계단세포중적표체이급재마배성은과정중적작용.방법:분별용농도위0、1、10、100화1000 μmol/L적마배화0、0.01、0.1、1화10 μmol/L납락동급성처리PC12세포,1h후Egr-1단백면역형광염색.마배만성처리실험분4조,A조,B조、C조화D조.C조화D조세포가입100 μmol/L마배,배양48h,A조화B조부가입동체적0.9%록화납.48h후B조화D조급여10 μmol/L납락동길항,A조화C조가입동체적0.9%록화납.재납락동길항후1、2、4、8화24h,Egr-1단백면역형광염색;용MTT비색법관찰각조PC12세포적손해,병용FITC-Annexin Ⅴ/PI류식조망검측시제합검측세포조망솔.결과:0～100 μmol/L마배급각농도적납락동작용하세포미견명현Egr-1양성염색,이1000 μmoL/L시유소량양성염색세포.D조재납락동계단후1 h즉출현Egr-1단백양성염색병지속24 h,병재12 h시가견부분세포절광성능력감약,세포중과립증다,핵고축병단렬성수개등.C조부유소허세포출현Egr-1양성염색.여A조상비교,C조세포생존솔하강,병재12 h화24 h시차이유통계학의의;이D조생존솔칙진일보하강,여A조화C조상비차이유통계학의의.FITC-Annexin Ⅴ/PI류식조망검측도C조세포조망8.42±2.09%,D조세포조망솔칙증가도37.62±7.19%.결론:마배만성처리혹마배만계단후출현Egr-1기인표체증가화세포조망,이Egr-1기인적표체증가화세포조망가능삼여마배성은궤제.