CAJ | 학술논문

目的:探讨G4PAMAM/VEGFASODN复合物体外对乳腺癌细胞MDA-MB-231VEGF、VEGF mRNA表达的影响及血管内皮细胞生长的抑制作用.方法:用透射电镜观测G4PAMAM/VEGFASODN的粒径,在不同的酸碱度下观察G4PAMAM/VEGFASODN的稳定性;将G4PAMAM/VEGFASODN进行体外转染,流式细胞仪测定其转染率,激光共聚焦检测转染阳性细胞,MTT法检测转染后细胞的存活率;免疫组化检测VEGF蛋白的表达,RT-PCR检测VEGF mRNA的表达,MTT法测定此复合物对血管内皮细胞生长的抑制作用.结果:G4PAMAM/VEGFASODN的直径约10 nm,呈较均匀的网状排列;酸碱度在5到10的范围内具有较高的稳定性,不同电荷比的G4PAMAM/VEGFASODN均没有出现被解离的现象;48 h 时G4PAMAM/VEGFASODN组在1∶40的条件下转染率明显高于脂质体组;各组转染物均对细胞无明显毒性;VEGF 蛋白在G4PAMAM/VEGFASODN转染后的MDA-MB-231细胞胞浆中的染色强度明显减弱,阳性表达率显著降低,VEGF mRNA的表达也受到有效的抑制.结论:G4PAMAM/VEGFASODN复合物稳定性好、转染率高,是一种有良好应用前景的新型纳米载体基因转移系统;G4PAMAM/VEGFASODN复合物能够高效特异地抑制目的基因VEGF的表达,为进一步进行体内动物实验提供了依据.
목적:탐토G4PAMAM/VEGFASODN복합물체외대유선암세포MDA-MB-231VEGF、VEGF mRNA표체적영향급혈관내피세포생장적억제작용.방법:용투사전경관측G4PAMAM/VEGFASODN적립경,재불동적산감도하관찰G4PAMAM/VEGFASODN적은정성;장G4PAMAM/VEGFASODN진행체외전염,류식세포의측정기전염솔,격광공취초검측전염양성세포,MTT법검측전염후세포적존활솔;면역조화검측VEGF단백적표체,RT-PCR검측VEGF mRNA적표체,MTT법측정차복합물대혈관내피세포생장적억제작용.결과:G4PAMAM/VEGFASODN적직경약10 nm,정교균균적망상배렬;산감도재5도10적범위내구유교고적은정성,불동전하비적G4PAMAM/VEGFASODN균몰유출현피해리적현상;48 h 시G4PAMAM/VEGFASODN조재1∶40적조건하전염솔명현고우지질체조;각조전염물균대세포무명현독성;VEGF 단백재G4PAMAM/VEGFASODN전염후적MDA-MB-231세포포장중적염색강도명현감약,양성표체솔현저강저,VEGF mRNA적표체야수도유효적억제.결론:G4PAMAM/VEGFASODN복합물은정성호、전염솔고,시일충유량호응용전경적신형납미재체기인전이계통;G4PAMAM/VEGFASODN복합물능구고효특이지억제목적기인VEGF적표체,위진일보진행체내동물실험제공료의거.