南方医科大学学报
南方醫科大學學報
남방의과대학학보
JOURNAL OF SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY
2008年
10期
1779-1781,1785
,共4页
程蔚蔚%李煜生%龚小卫%赵琳琳%王继刚%邓鹏%姜勇
程蔚蔚%李煜生%龔小衛%趙琳琳%王繼剛%鄧鵬%薑勇
정위위%리욱생%공소위%조림림%왕계강%산붕%강용
晚期糖基化终末产物受体%定点突变%载体构建%基因表达
晚期糖基化終末產物受體%定點突變%載體構建%基因錶達
만기당기화종말산물수체%정점돌변%재체구건%기인표체
目的 构建带HA标签的晚期糖基化终末产物受体(RAGE)不同突变体的真核细胞表达载体.方法 采用定点突变技术将亚克隆在载体pcDNA3-HA上的野生型RAGE构建成不同突变体pcDNA3-HA-RAGE(S391A)、pcDNA3-HA-RAGE(S399A)、pcDNA3-HA-RAGE(S400A)、pcDNA3-HA-RAGE(T401A),经测序鉴定正确后转染HEK293细胞,利用Western blotting检测各突变体的表达.结果 RAGE不同突变体经测序鉴定正确无误后.在HEK293细胞中得到高量表达.结论 成功构建了RAGE不同突变体的真核表达载体,并在真核细胞中进行了表达,为进一步研究RAGE在细胞信号转导中的作用奠定了基础.
目的 構建帶HA標籤的晚期糖基化終末產物受體(RAGE)不同突變體的真覈細胞錶達載體.方法 採用定點突變技術將亞剋隆在載體pcDNA3-HA上的野生型RAGE構建成不同突變體pcDNA3-HA-RAGE(S391A)、pcDNA3-HA-RAGE(S399A)、pcDNA3-HA-RAGE(S400A)、pcDNA3-HA-RAGE(T401A),經測序鑒定正確後轉染HEK293細胞,利用Western blotting檢測各突變體的錶達.結果 RAGE不同突變體經測序鑒定正確無誤後.在HEK293細胞中得到高量錶達.結論 成功構建瞭RAGE不同突變體的真覈錶達載體,併在真覈細胞中進行瞭錶達,為進一步研究RAGE在細胞信號轉導中的作用奠定瞭基礎.
목적 구건대HA표첨적만기당기화종말산물수체(RAGE)불동돌변체적진핵세포표체재체.방법 채용정점돌변기술장아극륭재재체pcDNA3-HA상적야생형RAGE구건성불동돌변체pcDNA3-HA-RAGE(S391A)、pcDNA3-HA-RAGE(S399A)、pcDNA3-HA-RAGE(S400A)、pcDNA3-HA-RAGE(T401A),경측서감정정학후전염HEK293세포,이용Western blotting검측각돌변체적표체.결과 RAGE불동돌변체경측서감정정학무오후.재HEK293세포중득도고량표체.결론 성공구건료RAGE불동돌변체적진핵표체재체,병재진핵세포중진행료표체,위진일보연구RAGE재세포신호전도중적작용전정료기출.
