中国耳鼻咽喉颅底外科杂志
中國耳鼻嚥喉顱底外科雜誌
중국이비인후로저외과잡지
CHINESE JOURNAL OF OTORHINOLARYNGOLOGY-SKULL BASE SURGERY
2008年
4期
251-254
,共4页
滕博%金春顺%文连姬%崔树勋
滕博%金春順%文連姬%崔樹勛
등박%금춘순%문련희%최수훈
真核细胞翻译起始因子-4E%体外转录%逆转录多聚酶链反应%喉肿瘤
真覈細胞翻譯起始因子-4E%體外轉錄%逆轉錄多聚酶鏈反應%喉腫瘤
진핵세포번역기시인자-4E%체외전록%역전록다취매련반응%후종류
目的 克隆喉癌eIF4E基因编码区的cDNA序列,并构建其体外转录载体,获得eIF4E基因编码区mRNA,以便进一步的体外实验研究.方法 利用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)法,以喉癌Hep-2细胞mRNA为模板,扩增获得全长eIF4E编码区eDNA,与pMD18T连接作全自动测序,并利用基因重组技术构建eIF4E基因mRNA体外转录载体pGEM-7 zf+eIF4E.用内切酶XhoI将含有eIF4E基因mRNA的pGEM-7 zf+eIF4E质粒消化成线性,以此为模板体外转录出用[a-32P]UTP标记的靶eID4E基因编码区mRNA.结果 经测序证实获得的eIF4E基因cDNA序列与Gene Bank一致,并成功构建了体外转录质粒pGEM-7 zf+eIF4E.结论 成功构建了体外转录质粒pGEM-7 zf+eIF4E,为进一步研究eIF4E的功能奠定了基础.
目的 剋隆喉癌eIF4E基因編碼區的cDNA序列,併構建其體外轉錄載體,穫得eIF4E基因編碼區mRNA,以便進一步的體外實驗研究.方法 利用逆轉錄多聚酶鏈反應(RT-PCR)法,以喉癌Hep-2細胞mRNA為模闆,擴增穫得全長eIF4E編碼區eDNA,與pMD18T連接作全自動測序,併利用基因重組技術構建eIF4E基因mRNA體外轉錄載體pGEM-7 zf+eIF4E.用內切酶XhoI將含有eIF4E基因mRNA的pGEM-7 zf+eIF4E質粒消化成線性,以此為模闆體外轉錄齣用[a-32P]UTP標記的靶eID4E基因編碼區mRNA.結果 經測序證實穫得的eIF4E基因cDNA序列與Gene Bank一緻,併成功構建瞭體外轉錄質粒pGEM-7 zf+eIF4E.結論 成功構建瞭體外轉錄質粒pGEM-7 zf+eIF4E,為進一步研究eIF4E的功能奠定瞭基礎.
목적 극륭후암eIF4E기인편마구적cDNA서렬,병구건기체외전록재체,획득eIF4E기인편마구mRNA,이편진일보적체외실험연구.방법 이용역전록다취매련반응(RT-PCR)법,이후암Hep-2세포mRNA위모판,확증획득전장eIF4E편마구eDNA,여pMD18T련접작전자동측서,병이용기인중조기술구건eIF4E기인mRNA체외전록재체pGEM-7 zf+eIF4E.용내절매XhoI장함유eIF4E기인mRNA적pGEM-7 zf+eIF4E질립소화성선성,이차위모판체외전록출용[a-32P]UTP표기적파eID4E기인편마구mRNA.결과 경측서증실획득적eIF4E기인cDNA서렬여Gene Bank일치,병성공구건료체외전록질립pGEM-7 zf+eIF4E.결론 성공구건료체외전록질립pGEM-7 zf+eIF4E,위진일보연구eIF4E적공능전정료기출.
