细胞与分子免疫学杂志
細胞與分子免疫學雜誌
세포여분자면역학잡지
2008年
2期
106-108,112
,共4页
陈晓湘%胡旭初%徐劲%郑南才%余新炳
陳曉湘%鬍旭初%徐勁%鄭南纔%餘新炳
진효상%호욱초%서경%정남재%여신병
大鼠%IgE依赖组胺释放因子%基因克隆%原核表达%肥大细胞%组胺
大鼠%IgE依賴組胺釋放因子%基因剋隆%原覈錶達%肥大細胞%組胺
대서%IgE의뢰조알석방인자%기인극륭%원핵표체%비대세포%조알
目的:获得原核表达的可溶性大鼠IgE依赖组胺释放因子(rHRF),并检测其诱发大鼠致敏肥大细胞释放组胺的功能.方法:克隆Wistar大鼠rHRF基因完整编码区序列并在BL21细胞中进行原核表达,纯化的可溶性重组rHRF刺激卵清蛋白变应原致敏的大鼠肺肥大细胞,利用荧光分光光度法测定组胺释放量.结果:测序证实克隆基因与GenBank中大鼠IgE依赖组胺释放因子(又称翻译控制肿瘤蛋白)mRNA序列的一致性为97%,推测的氨基酸序列一致性为95%.SDS-PAGE显示重组rHRF相对分子质量(Mr)约为24 000;重组rHRF诱发大鼠致敏肥大细胞释放组胺不依赖变应原,且呈剂量依赖关系. 结论:rHRF具有不依赖变应原诱发大鼠致敏肥大细胞释放组胺的功能,可能在Ⅰ型超敏反应过程中发挥重要作用,为进一步研究rHRF的免疫学功能打下基础.
目的:穫得原覈錶達的可溶性大鼠IgE依賴組胺釋放因子(rHRF),併檢測其誘髮大鼠緻敏肥大細胞釋放組胺的功能.方法:剋隆Wistar大鼠rHRF基因完整編碼區序列併在BL21細胞中進行原覈錶達,純化的可溶性重組rHRF刺激卵清蛋白變應原緻敏的大鼠肺肥大細胞,利用熒光分光光度法測定組胺釋放量.結果:測序證實剋隆基因與GenBank中大鼠IgE依賴組胺釋放因子(又稱翻譯控製腫瘤蛋白)mRNA序列的一緻性為97%,推測的氨基痠序列一緻性為95%.SDS-PAGE顯示重組rHRF相對分子質量(Mr)約為24 000;重組rHRF誘髮大鼠緻敏肥大細胞釋放組胺不依賴變應原,且呈劑量依賴關繫. 結論:rHRF具有不依賴變應原誘髮大鼠緻敏肥大細胞釋放組胺的功能,可能在Ⅰ型超敏反應過程中髮揮重要作用,為進一步研究rHRF的免疫學功能打下基礎.
목적:획득원핵표체적가용성대서IgE의뢰조알석방인자(rHRF),병검측기유발대서치민비대세포석방조알적공능.방법:극륭Wistar대서rHRF기인완정편마구서렬병재BL21세포중진행원핵표체,순화적가용성중조rHRF자격란청단백변응원치민적대서폐비대세포,이용형광분광광도법측정조알석방량.결과:측서증실극륭기인여GenBank중대서IgE의뢰조알석방인자(우칭번역공제종류단백)mRNA서렬적일치성위97%,추측적안기산서렬일치성위95%.SDS-PAGE현시중조rHRF상대분자질량(Mr)약위24 000;중조rHRF유발대서치민비대세포석방조알불의뢰변응원,차정제량의뢰관계. 결론:rHRF구유불의뢰변응원유발대서치민비대세포석방조알적공능,가능재Ⅰ형초민반응과정중발휘중요작용,위진일보연구rHRF적면역학공능타하기출.
