CAJ | 학술논문

[目的]骨形成蛋白-2(BMP-2)具有较强的诱导大鼠骨髓间充质于细胞(BMSCs)向成骨方向定向分化的能力.天然的BMP-2数量有限,结构复杂,限制了其广泛应用.本实验设计合成了BMP-2活性多肽,体外试验探讨其对BMSCs向成骨方向定向诱导成骨分化的能力,评价BMP-2活性多肽的诱导成骨效应.[方法]实验分2组,诱导组和非诱导组.取4周的Wistar大鼠分离培养BMSCs,传至第3代时,实验组,改用成骨诱导培养基(DMEM完全培养基+BMP-2活性多肽200 μg/ml).非诱导组,仍采用DMEM完全培养基.继续培养2～4周,采用细胞爬片培养、碱性磷酸酶活性和钙含量测定、实时定量PCR检测Ⅰ型胶原(C0l-Ⅰ)及骨桥蛋白(OPN)mRNA的表达,评价BMP-2活性多肽的体外诱导成骨能力.[结果]诱导组BMSCs生长良好,表现出与典型的成骨细胞相似的形态特征和生物学特性,ALP活性上升,钙含量增加,Col-Ⅰ和OPN的mRNA呈高表达.非诱导组,成骨特性不明显.[结论]合成的BMP-2活性多肽能有效地促进BMSCs向成骨方向分化,是组织工程化骨中理想的诱导成骨的细胞因子.具有与天然BMP-2类似的骨诱导活性,具有广阔的应用前景.
[목적]골형성단백-2(BMP-2)구유교강적유도대서골수간충질우세포(BMSCs)향성골방향정향분화적능력.천연적BMP-2수량유한,결구복잡,한제료기엄범응용.본실험설계합성료BMP-2활성다태,체외시험탐토기대BMSCs향성골방향정향유도성골분화적능력,평개BMP-2활성다태적유도성골효응.[방법]실험분2조,유도조화비유도조.취4주적Wistar대서분리배양BMSCs,전지제3대시,실험조,개용성골유도배양기(DMEM완전배양기+BMP-2활성다태200 μg/ml).비유도조,잉채용DMEM완전배양기.계속배양2～4주,채용세포파편배양、감성린산매활성화개함량측정、실시정량PCR검측Ⅰ형효원(C0l-Ⅰ)급골교단백(OPN)mRNA적표체,평개BMP-2활성다태적체외유도성골능력.[결과]유도조BMSCs생장량호,표현출여전형적성골세포상사적형태특정화생물학특성,ALP활성상승,개함량증가,Col-Ⅰ화OPN적mRNA정고표체.비유도조,성골특성불명현.[결론]합성적BMP-2활성다태능유효지촉진BMSCs향성골방향분화,시조직공정화골중이상적유도성골적세포인자.구유여천연BMP-2유사적골유도활성,구유엄활적응용전경.