CAJ | 학술논문

目的:探讨人转化生长因子-β1(hTGF-β1)基因修饰山羊骨髓基质干细胞(BMSCs)为种子细胞构建的组织工程化髓核对山羊退变腰椎间盘的修复作用.方法:用粗针穿刺山羊L1/2～L5/6纤维环抽取髓核制作椎间盘退变模型,同时体外培养山羊自体BMSCs并分为3组:实验组以携hTGF-β1基因重组腺病毒(Ad/hTGF-β1)转染;阴性对照组以携lacZ基因腺病毒(Ad/LacZ)转染,空白对照组为未转染细胞.抽取髓核后15d,收集3组细胞与透明质酸(HA)复合为组织工程化髓核,以细针从椎间盘原穿刺孔回植入髓核中央.L1/2至L3/4依次植入实验组、阴性对照组及空白对照组细胞;L4/5注入不含细胞的HA;L5/6不注入任何物质.术后观察24周,定期行放射学、组织学和生化检测.结果:X线片椎间隙测量显示,24周时L1/2～L4/5的椎间隙狭窄均较L5/6明显延迟(P＜0.05);4周以内L2/3间隙的X-gal染色保持阳性;组织学评估示L1/2～L4/5退变均较L5/6为轻;免疫组化示L1/2在4周内高表达hTGF-β1、CollagenⅡ和Aggrecan,但8周后L1/2至L4/5未见显著性差异;GAG定量显示整个观察期内L1/2～L4/5均高于L5/6,其含量依次为L1/2＞L2/3=L3/4＞L4/5;对4周时L1/2至L3/4髓核组织的RT-PCR显示,L1/2的hTGF-β1、CollagenⅡ及Aggrecan的mRNA表达显著增强(P＜0.05).结论:体外构建的组织工程化髓核回植可延缓椎间盘早期退变的进程,经hTGF-β1基因增强的组织工程化髓核对退变延缓作用尤为显著,但均无法完全逆转整个椎间盘退变进程.
목적:탐토인전화생장인자-β1(hTGF-β1)기인수식산양골수기질간세포(BMSCs)위충자세포구건적조직공정화수핵대산양퇴변요추간반적수복작용.방법:용조침천자산양L1/2～L5/6섬유배추취수핵제작추간반퇴변모형,동시체외배양산양자체BMSCs병분위3조:실험조이휴hTGF-β1기인중조선병독(Ad/hTGF-β1)전염;음성대조조이휴lacZ기인선병독(Ad/LacZ)전염,공백대조조위미전염세포.추취수핵후15d,수집3조세포여투명질산(HA)복합위조직공정화수핵,이세침종추간반원천자공회식입수핵중앙.L1/2지L3/4의차식입실험조、음성대조조급공백대조조세포;L4/5주입불함세포적HA;L5/6불주입임하물질.술후관찰24주,정기행방사학、조직학화생화검측.결과:X선편추간극측량현시,24주시L1/2～L4/5적추간극협착균교L5/6명현연지(P＜0.05);4주이내L2/3간극적X-gal염색보지양성;조직학평고시L1/2～L4/5퇴변균교L5/6위경;면역조화시L1/2재4주내고표체hTGF-β1、CollagenⅡ화Aggrecan,단8주후L1/2지L4/5미견현저성차이;GAG정량현시정개관찰기내L1/2～L4/5균고우L5/6,기함량의차위L1/2＞L2/3=L3/4＞L4/5;대4주시L1/2지L3/4수핵조직적RT-PCR현시,L1/2적hTGF-β1、CollagenⅡ급Aggrecan적mRNA표체현저증강(P＜0.05).결론:체외구건적조직공정화수핵회식가연완추간반조기퇴변적진정,경hTGF-β1기인증강적조직공정화수핵대퇴변연완작용우위현저,단균무법완전역전정개추간반퇴변진정.