生物技术通报
生物技術通報
생물기술통보
BIOTECHNOLOGY BULLETIN
2007年
5期
136-140,147
,共6页
康楷%李铁军%胡丽娜%张才全%张秉强
康楷%李鐵軍%鬍麗娜%張纔全%張秉彊
강해%리철군%호려나%장재전%장병강
RNA干扰%VEGF%细胞凋亡%结肠癌细胞
RNA榦擾%VEGF%細胞凋亡%結腸癌細胞
RNA간우%VEGF%세포조망%결장암세포
目的:应用RNA干扰技术抑制血管内皮生长因子(VEGF)表达,并通过体内实验,观察在体内复杂环境下能否有效抑制VEGF表达,以及结肠癌细胞凋亡的情况,为RNA干扰技术的临床应用奠定基础.方法:体内实验中,将RNA干扰质粒以水动力法导入结肠癌裸鼠模型,通过RT-PCR观察VEGF mRNA表达受抑的程度;Western杂交检测VEGF蛋白的表达情况;通过测量比较瘤体大小和Tunel法,观察VEGF受抑制后,肿瘤形态和细胞凋亡的变化.结果:体内实验中,通过RT-PCR和Western杂交检测,发现这两种抗VEGF表达载体能够有效抑抑制裸鼠结肠癌模型瘤体VEGF的表达;VEGF受抑制后,瘤体增长受到抑制,Tunel法显示,RNA干扰可致肿瘤细胞凋亡增加.结论:Tunel法分析显示,当VEGF受抑制后,肿瘤细胞凋亡发生率明显增加,针对VEGF基因的shRNA表达载体能够明显抑制裸鼠VEGF基因的表达.
目的:應用RNA榦擾技術抑製血管內皮生長因子(VEGF)錶達,併通過體內實驗,觀察在體內複雜環境下能否有效抑製VEGF錶達,以及結腸癌細胞凋亡的情況,為RNA榦擾技術的臨床應用奠定基礎.方法:體內實驗中,將RNA榦擾質粒以水動力法導入結腸癌裸鼠模型,通過RT-PCR觀察VEGF mRNA錶達受抑的程度;Western雜交檢測VEGF蛋白的錶達情況;通過測量比較瘤體大小和Tunel法,觀察VEGF受抑製後,腫瘤形態和細胞凋亡的變化.結果:體內實驗中,通過RT-PCR和Western雜交檢測,髮現這兩種抗VEGF錶達載體能夠有效抑抑製裸鼠結腸癌模型瘤體VEGF的錶達;VEGF受抑製後,瘤體增長受到抑製,Tunel法顯示,RNA榦擾可緻腫瘤細胞凋亡增加.結論:Tunel法分析顯示,噹VEGF受抑製後,腫瘤細胞凋亡髮生率明顯增加,針對VEGF基因的shRNA錶達載體能夠明顯抑製裸鼠VEGF基因的錶達.
목적:응용RNA간우기술억제혈관내피생장인자(VEGF)표체,병통과체내실험,관찰재체내복잡배경하능부유효억제VEGF표체,이급결장암세포조망적정황,위RNA간우기술적림상응용전정기출.방법:체내실험중,장RNA간우질립이수동역법도입결장암라서모형,통과RT-PCR관찰VEGF mRNA표체수억적정도;Western잡교검측VEGF단백적표체정황;통과측량비교류체대소화Tunel법,관찰VEGF수억제후,종류형태화세포조망적변화.결과:체내실험중,통과RT-PCR화Western잡교검측,발현저량충항VEGF표체재체능구유효억억제라서결장암모형류체VEGF적표체;VEGF수억제후,류체증장수도억제,Tunel법현시,RNA간우가치종류세포조망증가.결론:Tunel법분석현시,당VEGF수억제후,종류세포조망발생솔명현증가,침대VEGF기인적shRNA표체재체능구명현억제라서VEGF기인적표체.
