CAJ | 학술논문

目的:在整个生长期中鹿茸生长速度的变化,究竟是由鹿茸生长中心细胞本身对生长因子刺激的敏感度引起,还是由激素等外部因素所导致目前尚不清楚.实验利用细胞培养技术观察胰岛素样生长因子1对不同生长期的鹿茸生长中心细胞体外增殖的影响.方法:实验于2005-03/2006-06在吉林大学畜牧兽医学院基础兽医研究室完成.①实验方法:3头4岁龄的健康梅花鹿,分别在鹿茸生长的早期(生长30 d)、中期(生长60 d)、晚期(生长90 d)三期各锯取1头鹿的鹿茸,在解剖显微镜下定位和切取间质层(突起部),即为鹿茸生长中心细胞所在的组织层.原代分离培养不同生长期的鹿茸生长中心细胞,锥虫蓝染色显示细胞活性达90%以上,活性确定后的细胞液氮冻存.取第2代细胞,经1,3,10 nmol/L胰岛素样生长因子1处理24 h.设立空白对照组,用不含犊牛血清的等量培养液来替换孔中正常培养液.②实验评估:3H-胸腺嘧啶核苷法检测蛋白合成放射性含量,单位为Bq.结果:①不同生长时期鹿茸生长中心细胞的分离与培养:贴壁的鹿茸生长中心细胞形态均匀,呈梭形,克隆样生长,增殖迅速.不同生长期的鹿茸生长中心细胞生长速度不同,60 d的鹿茸生长中心细胞生长最快,90 d次之,30 d最慢.②胰岛素样生长因子1对不同生长期鹿茸生长中心细胞蛋白合成放射性含量的影响:取材于生长30 d的鹿茸生长中心细胞,胰岛素样生长因子1各浓度组的蛋白合成放射性含量均值为49.8 Bq,是空白对照组(5.2±0.6)Bq的9.64倍,差异有显著性意义(P＜0.01).取材于生长60 d的鹿茸生长中心细胞,胰岛素样生长因子1各浓度组的蛋白合成放射性含量均值为532.0 Bq,是空白对照组(137±5.4)Bq的38.93倍,差异有显著性意义(P＜0.01).取材于生长90 d的鹿茸生长中心细胞,胰岛素样生长因子1各浓度组的蛋白合成放射性含量均值为535.8 Bq,是空白对照组(109.8±27.0)Bq的4.88倍,差异有显著性意义(P＜0.01).结论:①胰岛素样生长因子1有促进鹿茸生长中心细胞分裂增殖的作用.②不同生长期的鹿茸生长中心细胞对胰岛素样生长因子1刺激的敏感度不同,生长期为60 d时尤为显著,该敏感度与取材细胞时鹿茸的生长速度相关. 目的:在整箇生長期中鹿茸生長速度的變化,究竟是由鹿茸生長中心細胞本身對生長因子刺激的敏感度引起,還是由激素等外部因素所導緻目前尚不清楚.實驗利用細胞培養技術觀察胰島素樣生長因子1對不同生長期的鹿茸生長中心細胞體外增殖的影響.方法:實驗于2005-03/2006-06在吉林大學畜牧獸醫學院基礎獸醫研究室完成.①實驗方法:3頭4歲齡的健康梅花鹿,分彆在鹿茸生長的早期(生長30 d)、中期(生長60 d)、晚期(生長90 d)三期各鋸取1頭鹿的鹿茸,在解剖顯微鏡下定位和切取間質層(突起部),即為鹿茸生長中心細胞所在的組織層.原代分離培養不同生長期的鹿茸生長中心細胞,錐蟲藍染色顯示細胞活性達90%以上,活性確定後的細胞液氮凍存.取第2代細胞,經1,3,10 nmol/L胰島素樣生長因子1處理24 h.設立空白對照組,用不含犢牛血清的等量培養液來替換孔中正常培養液.②實驗評估:3H-胸腺嘧啶覈苷法檢測蛋白閤成放射性含量,單位為Bq.結果:①不同生長時期鹿茸生長中心細胞的分離與培養:貼壁的鹿茸生長中心細胞形態均勻,呈梭形,剋隆樣生長,增殖迅速.不同生長期的鹿茸生長中心細胞生長速度不同,60 d的鹿茸生長中心細胞生長最快,90 d次之,30 d最慢.②胰島素樣生長因子1對不同生長期鹿茸生長中心細胞蛋白閤成放射性含量的影響:取材于生長30 d的鹿茸生長中心細胞,胰島素樣生長因子1各濃度組的蛋白閤成放射性含量均值為49.8 Bq,是空白對照組(5.2±0.6)Bq的9.64倍,差異有顯著性意義(P＜0.01).取材于生長60 d的鹿茸生長中心細胞,胰島素樣生長因子1各濃度組的蛋白閤成放射性含量均值為532.0 Bq,是空白對照組(137±5.4)Bq的38.93倍,差異有顯著性意義(P＜0.01).取材于生長90 d的鹿茸生長中心細胞,胰島素樣生長因子1各濃度組的蛋白閤成放射性含量均值為535.8 Bq,是空白對照組(109.8±27.0)Bq的4.88倍,差異有顯著性意義(P＜0.01).結論:①胰島素樣生長因子1有促進鹿茸生長中心細胞分裂增殖的作用.②不同生長期的鹿茸生長中心細胞對胰島素樣生長因子1刺激的敏感度不同,生長期為60 d時尤為顯著,該敏感度與取材細胞時鹿茸的生長速度相關.
목적:재정개생장기중록용생장속도적변화,구경시유록용생장중심세포본신대생장인자자격적민감도인기,환시유격소등외부인소소도치목전상불청초.실험이용세포배양기술관찰이도소양생장인자1대불동생장기적록용생장중심세포체외증식적영향.방법:실험우2005-03/2006-06재길림대학축목수의학원기출수의연구실완성.①실험방법:3두4세령적건강매화록,분별재록용생장적조기(생장30 d)、중기(생장60 d)、만기(생장90 d)삼기각거취1두록적록용,재해부현미경하정위화절취간질층(돌기부),즉위록용생장중심세포소재적조직층.원대분리배양불동생장기적록용생장중심세포,추충람염색현시세포활성체90%이상,활성학정후적세포액담동존.취제2대세포,경1,3,10 nmol/L이도소양생장인자1처리24 h.설립공백대조조,용불함독우혈청적등량배양액래체환공중정상배양액.②실험평고:3H-흉선밀정핵감법검측단백합성방사성함량,단위위Bq.결과:①불동생장시기록용생장중심세포적분리여배양:첩벽적록용생장중심세포형태균균,정사형,극륭양생장,증식신속.불동생장기적록용생장중심세포생장속도불동,60 d적록용생장중심세포생장최쾌,90 d차지,30 d최만.②이도소양생장인자1대불동생장기록용생장중심세포단백합성방사성함량적영향:취재우생장30 d적록용생장중심세포,이도소양생장인자1각농도조적단백합성방사성함량균치위49.8 Bq,시공백대조조(5.2±0.6)Bq적9.64배,차이유현저성의의(P＜0.01).취재우생장60 d적록용생장중심세포,이도소양생장인자1각농도조적단백합성방사성함량균치위532.0 Bq,시공백대조조(137±5.4)Bq적38.93배,차이유현저성의의(P＜0.01).취재우생장90 d적록용생장중심세포,이도소양생장인자1각농도조적단백합성방사성함량균치위535.8 Bq,시공백대조조(109.8±27.0)Bq적4.88배,차이유현저성의의(P＜0.01).결론:①이도소양생장인자1유촉진록용생장중심세포분렬증식적작용.②불동생장기적록용생장중심세포대이도소양생장인자1자격적민감도불동,생장기위60 d시우위현저,해민감도여취재세포시록용적생장속도상관.