中国肿瘤生物治疗杂志
中國腫瘤生物治療雜誌
중국종류생물치료잡지
CHINESE JOURNAL OF CANCER BIOTHERAPY
2007年
4期
333-337
,共5页
曹婧%赵洪礼%黄敏%戈全治%宁安红
曹婧%趙洪禮%黃敏%戈全治%寧安紅
조청%조홍례%황민%과전치%저안홍
肿瘤特异性凋亡基因%凋亡%Caspase-3%基因治疗
腫瘤特異性凋亡基因%凋亡%Caspase-3%基因治療
종류특이성조망기인%조망%Caspase-3%기인치료
目的: 研究Caspase-3在Apoptin gene诱导Hela细胞凋亡中的作用.方法: 用含有Apoptin基因的真核表达载体pcDNAA3瞬间转染体外培养的Hela细胞;Hela细胞瞬间转染后0、24、48、72和96 h,分为正常的Hela细胞对照组,pcDNA3.1质粒转染对照组和实验组.分别采用RT-PCR、DNA凝胶电泳、流式细胞术检测Hela细胞的凋亡;以比色法检测Caspase-3的相对活性.结果: 以转染后24、48和72 h Hela细胞的总RNA 为模板,经RT-PCR均可扩增出Apoptin cDNA, 正常Hela细胞和空载体转染细胞均为阴性表明Apoptin 已在转染细胞中表达;Apoptin基因瞬间转染的Hela细胞可出现典型的细胞凋亡所具有的DNA梯状带, 表明有凋亡发生;FCM检测发现, 以Apoptin基因转染后48 h,在DNA直方上的G1峰前,即出现1个明显的亚2倍体峰(亚G1峰,即凋亡峰),并随着转染时间延长而增强.细胞凋亡率与对照组相比较差异显著(P＜0.05 ).Hela细胞经pcDNAA3质粒转染后24 h实验组Caspase-3的活性开始升高,72 h达高峰,明显高于正常细胞对照组和pcDNA3.1对照组(P＜0.01).结论: Apoptin基因可通过激活Caspase-3诱导Hela细胞凋亡.
目的: 研究Caspase-3在Apoptin gene誘導Hela細胞凋亡中的作用.方法: 用含有Apoptin基因的真覈錶達載體pcDNAA3瞬間轉染體外培養的Hela細胞;Hela細胞瞬間轉染後0、24、48、72和96 h,分為正常的Hela細胞對照組,pcDNA3.1質粒轉染對照組和實驗組.分彆採用RT-PCR、DNA凝膠電泳、流式細胞術檢測Hela細胞的凋亡;以比色法檢測Caspase-3的相對活性.結果: 以轉染後24、48和72 h Hela細胞的總RNA 為模闆,經RT-PCR均可擴增齣Apoptin cDNA, 正常Hela細胞和空載體轉染細胞均為陰性錶明Apoptin 已在轉染細胞中錶達;Apoptin基因瞬間轉染的Hela細胞可齣現典型的細胞凋亡所具有的DNA梯狀帶, 錶明有凋亡髮生;FCM檢測髮現, 以Apoptin基因轉染後48 h,在DNA直方上的G1峰前,即齣現1箇明顯的亞2倍體峰(亞G1峰,即凋亡峰),併隨著轉染時間延長而增彊.細胞凋亡率與對照組相比較差異顯著(P＜0.05 ).Hela細胞經pcDNAA3質粒轉染後24 h實驗組Caspase-3的活性開始升高,72 h達高峰,明顯高于正常細胞對照組和pcDNA3.1對照組(P＜0.01).結論: Apoptin基因可通過激活Caspase-3誘導Hela細胞凋亡.
목적: 연구Caspase-3재Apoptin gene유도Hela세포조망중적작용.방법: 용함유Apoptin기인적진핵표체재체pcDNAA3순간전염체외배양적Hela세포;Hela세포순간전염후0、24、48、72화96 h,분위정상적Hela세포대조조,pcDNA3.1질립전염대조조화실험조.분별채용RT-PCR、DNA응효전영、류식세포술검측Hela세포적조망;이비색법검측Caspase-3적상대활성.결과: 이전염후24、48화72 h Hela세포적총RNA 위모판,경RT-PCR균가확증출Apoptin cDNA, 정상Hela세포화공재체전염세포균위음성표명Apoptin 이재전염세포중표체;Apoptin기인순간전염적Hela세포가출현전형적세포조망소구유적DNA제상대, 표명유조망발생;FCM검측발현, 이Apoptin기인전염후48 h,재DNA직방상적G1봉전,즉출현1개명현적아2배체봉(아G1봉,즉조망봉),병수착전염시간연장이증강.세포조망솔여대조조상비교차이현저(P＜0.05 ).Hela세포경pcDNAA3질립전염후24 h실험조Caspase-3적활성개시승고,72 h체고봉,명현고우정상세포대조조화pcDNA3.1대조조(P＜0.01).결론: Apoptin기인가통과격활Caspase-3유도Hela세포조망.
