蚕业科学
蠶業科學
잠업과학
ACTA SERICOLOGICA SINICA
2007年
1期
85-90
,共6页
家蚕丝素%类丝蛋白%精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸%盐析法
傢蠶絲素%類絲蛋白%精氨痠-甘氨痠-天鼕氨痠%鹽析法
가잠사소%류사단백%정안산-감안산-천동안산%염석법
利用基因重组技术合成了具有良好细胞粘附活性的重组家蚕丝素-RGD融合蛋白质(Silk-RGD),探讨了其盐析的工艺条件.研究发现,在融合蛋白等电点pH 8附近,当硫酸铵在溶液中的饱和度较低(10%)时,其蛋白质沉淀量随着温度的升高而增加;当硫酸铵的饱和度升至20%时,蛋白质沉淀量不再随着温度的变化而变化,但与低饱和度硫酸铵时相比,沉淀量明显增加;当硫酸铵的饱和度升至30%或以上时,沉淀中杂蛋白含量明显增多,不利于目的蛋白的纯化.Silk-RGD融合蛋白相对合理而且易操作的盐析纯化条件为:pH 8,硫酸铵在溶液中的饱和度为20%,室温(约20 ℃).利用该工艺条件,可以低成本、高效率地生产Silk-RGD融合蛋白,从而满足新型材料规模化开发的需要.
利用基因重組技術閤成瞭具有良好細胞粘附活性的重組傢蠶絲素-RGD融閤蛋白質(Silk-RGD),探討瞭其鹽析的工藝條件.研究髮現,在融閤蛋白等電點pH 8附近,噹硫痠銨在溶液中的飽和度較低(10%)時,其蛋白質沉澱量隨著溫度的升高而增加;噹硫痠銨的飽和度升至20%時,蛋白質沉澱量不再隨著溫度的變化而變化,但與低飽和度硫痠銨時相比,沉澱量明顯增加;噹硫痠銨的飽和度升至30%或以上時,沉澱中雜蛋白含量明顯增多,不利于目的蛋白的純化.Silk-RGD融閤蛋白相對閤理而且易操作的鹽析純化條件為:pH 8,硫痠銨在溶液中的飽和度為20%,室溫(約20 ℃).利用該工藝條件,可以低成本、高效率地生產Silk-RGD融閤蛋白,從而滿足新型材料規模化開髮的需要.
이용기인중조기술합성료구유량호세포점부활성적중조가잠사소-RGD융합단백질(Silk-RGD),탐토료기염석적공예조건.연구발현,재융합단백등전점pH 8부근,당류산안재용액중적포화도교저(10%)시,기단백질침정량수착온도적승고이증가;당류산안적포화도승지20%시,단백질침정량불재수착온도적변화이변화,단여저포화도류산안시상비,침정량명현증가;당류산안적포화도승지30%혹이상시,침정중잡단백함량명현증다,불리우목적단백적순화.Silk-RGD융합단백상대합리이차역조작적염석순화조건위:pH 8,류산안재용액중적포화도위20%,실온(약20 ℃).이용해공예조건,가이저성본、고효솔지생산Silk-RGD융합단백,종이만족신형재료규모화개발적수요.