畜禽业
畜禽業
축금업
2006年
6期
8-11
,共4页
胡雄贵%肖兵南%邓绪芳%燕海峰
鬍雄貴%肖兵南%鄧緒芳%燕海峰
호웅귀%초병남%산서방%연해봉
奶牛%RAPD%反应条件
奶牛%RAPD%反應條件
내우%RAPD%반응조건
以中国荷斯坦奶牛为实验材料,研究了Mg2+浓度、dNTPs浓度、引物浓度、模板DNA浓度、TaqDNA聚合酶,以及退火温度对RAPD反应的影响,建立一套适合中国荷斯坦牛的最佳RAPD反应体系.反应总体积为20μL,Mg2+浓度为2.5mmol/L,TaqDNA聚合酶浓度为1 U,引物浓度为2 μmol/L,dNTPs浓度为400μmol/L,模板DNA浓度为100ng.PCR反应程序:94℃预变性2min→40循环(94℃变性1 min→36℃退火1 min→72℃延伸1 min)→72℃延伸5 min.
以中國荷斯坦奶牛為實驗材料,研究瞭Mg2+濃度、dNTPs濃度、引物濃度、模闆DNA濃度、TaqDNA聚閤酶,以及退火溫度對RAPD反應的影響,建立一套適閤中國荷斯坦牛的最佳RAPD反應體繫.反應總體積為20μL,Mg2+濃度為2.5mmol/L,TaqDNA聚閤酶濃度為1 U,引物濃度為2 μmol/L,dNTPs濃度為400μmol/L,模闆DNA濃度為100ng.PCR反應程序:94℃預變性2min→40循環(94℃變性1 min→36℃退火1 min→72℃延伸1 min)→72℃延伸5 min.
이중국하사탄내우위실험재료,연구료Mg2+농도、dNTPs농도、인물농도、모판DNA농도、TaqDNA취합매,이급퇴화온도대RAPD반응적영향,건립일투괄합중국하사탄우적최가RAPD반응체계.반응총체적위20μL,Mg2+농도위2.5mmol/L,TaqDNA취합매농도위1 U,인물농도위2 μmol/L,dNTPs농도위400μmol/L,모판DNA농도위100ng.PCR반응정서:94℃예변성2min→40순배(94℃변성1 min→36℃퇴화1 min→72℃연신1 min)→72℃연신5 min.