CAJ | 학술논문

体细胞克隆的效率非常低,只有低于4%的重组胚胎可以发育成个体,而且许多的克隆动物在出生后不久死亡并表现出组织器官的发育异常.为了探讨造成克隆动物出生死亡以及器官发育异常的可能分子机理,用荧光定量RT-PCR技术分析了4个对染色质进行修饰的基因(DNMT1,PCAF,MeCP2,EED)在分别来自两种供体细胞(成年成纤维细胞和胎儿成纤维细胞)的出生死亡克隆牛的6个组织(心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏和大脑)的表达.结果发现,DNMT1在两种供体细胞的克隆牛心脏(P < 0.05)、肝脏(P < 0.05)和大脑(P < 0.01)中的表达显著高于正常对照牛;PCAF则在心脏(P < 0.01)和肝脏(P < 0.05)中的表达显著高于正常对照牛,而在成年成纤维供体细胞克隆牛的脾脏(P < 0.05)中显著降低;MeCP2和EED基因在体细胞克隆牛中的表达与正常对照牛中无显著差异.由于DNMT1和PCAF基因在DNA的甲基化以及组蛋白的乙酰化中起重要作用,其正常表达为供体核后成修饰的精确重编程所必须,所以DNMT1和PCAF的异常表达可能是造成克隆动物出生死亡以及器官发育异常的原因之一.
체세포극륭적효솔비상저,지유저우4%적중조배태가이발육성개체,이차허다적극륭동물재출생후불구사망병표현출조직기관적발육이상.위료탐토조성극륭동물출생사망이급기관발육이상적가능분자궤리,용형광정량RT-PCR기술분석료4개대염색질진행수식적기인(DNMT1,PCAF,MeCP2,EED)재분별래자량충공체세포(성년성섬유세포화태인성섬유세포)적출생사망극륭우적6개조직(심장、간장、비장、폐장、신장화대뇌)적표체.결과발현,DNMT1재량충공체세포적극륭우심장(P < 0.05)、간장(P < 0.05)화대뇌(P < 0.01)중적표체현저고우정상대조우;PCAF칙재심장(P < 0.01)화간장(P < 0.05)중적표체현저고우정상대조우,이재성년성섬유공체세포극륭우적비장(P < 0.05)중현저강저;MeCP2화EED기인재체세포극륭우중적표체여정상대조우중무현저차이.유우DNMT1화PCAF기인재DNA적갑기화이급조단백적을선화중기중요작용,기정상표체위공체핵후성수식적정학중편정소필수,소이DNMT1화PCAF적이상표체가능시조성극륭동물출생사망이급기관발육이상적원인지일.