SARS冠状病毒M基因的克隆及其表达
SARS관상병독M기인적극륭급기표체
Cloning and Expression of SARS Coronavirus M Gene
  • 万方数据
    中国病毒学 중국병독학
    VIROLOGICA SINICA
    2005年 1期 1-4 ,共4页

    晏辉钧%赵卫%方丹云%周经姣%龙北国%张文炳%郭辉玉%江丽芳

    안휘균%조위%방단운%주경교%룡북국%장문병%곽휘옥%강려방

    SARS冠状病毒%M基因%克隆%巴氏毕赤酵母%表达 SARS冠狀病毒%M基因%剋隆%巴氏畢赤酵母%錶達
    SARS관상병독%M기인%극륭%파씨필적효모%표체
    从SARS冠状病毒(GD322株)组织培养上清中提取RNA,进行RT-PCR扩增其M基因并克隆到巴氏毕赤酵母表达载体pPICZαB,电穿孔法将重组体整合入酵母菌P.pastoris,经抗生素Zeocin筛选产生的转化子进行表型鉴定,取Mut+菌用甲醇诱导表达,SDS-PAGE检测其表达产物.Mut+酵母转化菌经甲醇诱导可分泌表达约65kDa和42 kDa的蛋白质,与SARS恢复期病人血清的免疫印迹证实它们为特异的重组M蛋白质,且获得的重组M蛋白质具有免疫反应性.
    종SARS관상병독(GD322주)조직배양상청중제취RNA,진행RT-PCR확증기M기인병극륭도파씨필적효모표체재체pPICZαB,전천공법장중조체정합입효모균P.pastoris,경항생소Zeocin사선산생적전화자진행표형감정,취Mut+균용갑순유도표체,SDS-PAGE검측기표체산물.Mut+효모전화균경갑순유도가분비표체약65kDa화42 kDa적단백질,여SARS회복기병인혈청적면역인적증실타문위특이적중조M단백질,차획득적중조M단백질구유면역반응성.
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