中国生物化学与分子生物学报
中國生物化學與分子生物學報
중국생물화학여분자생물학보
CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY
2004年
1期
101-106
,共6页
李孟森%李平风%贺师鹏%杜国光%李刚
李孟森%李平風%賀師鵬%杜國光%李剛
리맹삼%리평풍%하사붕%두국광%리강
甲胎蛋白%受体%信号转导
甲胎蛋白%受體%信號轉導
갑태단백%수체%신호전도
研究Heh细胞膜上甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)受体的存在情况及其介导的信号转导.先用Na[125I]标记AFP;标记的AFP和培养的HeLa细胞结合,Scatchard法和受体-配体结合法分析受体数目;再用放射免疫结合法分析在百日咳毒素(pertussis toxin,PTX)预处理前后AFP对细胞内环腺苷酸(cAMP)浓度及细胞内蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)活性变化的影响.在HeLa细胞膜表面存在2种不同解离平衡常数(Kd)的AFP受体,Kd1=52 pmol/L(2100位点/细胞);Kd2=2.3nmol/L(11400位点/细胞).在AFP(20mg/L)作用下,HeLa细胞内cAMP浓度变化及PKA活性的改变为与对照组比较,用PTX预处理前cAMP浓度升高267%,PKA活性增高103.2%;用PTX预处理后升高86%,PKA活性增高25.3%.抗甲胎蛋白单克隆抗体可阻断AFP对细胞cAMP浓度和PKA活性的影响.结果证明,在HeLa细胞膜上有2种不同解离平衡常数的甲胎蛋白受体存在,受体有可能通过cAMP-PKA途径介导信号转导.
研究Heh細胞膜上甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)受體的存在情況及其介導的信號轉導.先用Na[125I]標記AFP;標記的AFP和培養的HeLa細胞結閤,Scatchard法和受體-配體結閤法分析受體數目;再用放射免疫結閤法分析在百日咳毒素(pertussis toxin,PTX)預處理前後AFP對細胞內環腺苷痠(cAMP)濃度及細胞內蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)活性變化的影響.在HeLa細胞膜錶麵存在2種不同解離平衡常數(Kd)的AFP受體,Kd1=52 pmol/L(2100位點/細胞);Kd2=2.3nmol/L(11400位點/細胞).在AFP(20mg/L)作用下,HeLa細胞內cAMP濃度變化及PKA活性的改變為與對照組比較,用PTX預處理前cAMP濃度升高267%,PKA活性增高103.2%;用PTX預處理後升高86%,PKA活性增高25.3%.抗甲胎蛋白單剋隆抗體可阻斷AFP對細胞cAMP濃度和PKA活性的影響.結果證明,在HeLa細胞膜上有2種不同解離平衡常數的甲胎蛋白受體存在,受體有可能通過cAMP-PKA途徑介導信號轉導.
연구Heh세포막상갑태단백(alpha-fetoprotein,AFP)수체적존재정황급기개도적신호전도.선용Na[125I]표기AFP;표기적AFP화배양적HeLa세포결합,Scatchard법화수체-배체결합법분석수체수목;재용방사면역결합법분석재백일해독소(pertussis toxin,PTX)예처리전후AFP대세포내배선감산(cAMP)농도급세포내단백격매A(protein kinase A,PKA)활성변화적영향.재HeLa세포막표면존재2충불동해리평형상수(Kd)적AFP수체,Kd1=52 pmol/L(2100위점/세포);Kd2=2.3nmol/L(11400위점/세포).재AFP(20mg/L)작용하,HeLa세포내cAMP농도변화급PKA활성적개변위여대조조비교,용PTX예처리전cAMP농도승고267%,PKA활성증고103.2%;용PTX예처리후승고86%,PKA활성증고25.3%.항갑태단백단극륭항체가조단AFP대세포cAMP농도화PKA활성적영향.결과증명,재HeLa세포막상유2충불동해리평형상수적갑태단백수체존재,수체유가능통과cAMP-PKA도경개도신호전도.
