CAJ | 학술논문

目的考察具有多个优势抗原表位区段嵌合表达的戊型肝炎病毒(HEV)重组抗原的免疫学性质.方法将构建的含有3个不同HEV抗原表位基因ORF2.16287～6403ntORF2.26743～7126ntORF3 的表达质粒pThioHisORF2.1+2.2+3 在大肠杆菌中进行异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,其表达产物P2.1+2.2+3 在8mol/L尿素下经阳离子柱SPSepharoseFF层析纯化,透析复性.以P2.1+2.2+3 免疫家兔和小鼠通过ELISA检测实验动物血清及戊型肝炎患者阳性血清IgG抗体,以Western蛋白印迹检测动物免疫血清对杆状病毒系统表达的抗原片段及嵌合抗原P2.1+2.2+3 对患者阳性血清的免疫反应性.结果纯化的抗原纯度达90%以上;免疫动物血清中检测到特异性抗体的滴度分别为1∶25600(家兔)和1∶12800(小鼠)以上,抗血清能够特异识别杆状病毒系统表达的HEV抗原片段,P2.1+2.2+3 能与患者阳性血清特异反应.结论嵌合表达的HEV重组抗原P2.1+2.2+3 具有良好的免疫原性和免疫反应性,为进一步研究开发HEV诊断试剂盒及基因工程疫苗提供了基础.
목적고찰구유다개우세항원표위구단감합표체적무형간염병독(HEV)중조항원적면역학성질.방법장구건적함유3개불동HEV항원표위기인ORF2.16287～6403ntORF2.26743～7126ntORF3 적표체질립pThioHisORF2.1+2.2+3 재대장간균중진행이병기류대반유당감(IPTG)유도표체,기표체산물P2.1+2.2+3 재8mol/L뇨소하경양리자주SPSepharoseFF층석순화,투석복성.이P2.1+2.2+3 면역가토화소서통과ELISA검측실험동물혈청급무형간염환자양성혈청IgG항체,이Western단백인적검측동물면역혈청대간상병독계통표체적항원편단급감합항원P2.1+2.2+3 대환자양성혈청적면역반응성.결과순화적항원순도체90%이상;면역동물혈청중검측도특이성항체적적도분별위1∶25600(가토)화1∶12800(소서)이상,항혈청능구특이식별간상병독계통표체적HEV항원편단,P2.1+2.2+3 능여환자양성혈청특이반응.결론감합표체적HEV중조항원P2.1+2.2+3 구유량호적면역원성화면역반응성,위진일보연구개발HEV진단시제합급기인공정역묘제공료기출.