中国生物化学与分子生物学报
中國生物化學與分子生物學報
중국생물화학여분자생물학보
CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY
2001年
1期
75-79
,共5页
党昕%纪建国%茹强%杨晶鑫%俞梅敏%茹炳根
黨昕%紀建國%茹彊%楊晶鑫%俞梅敏%茹炳根
당흔%기건국%여강%양정흠%유매민%여병근
纤溶酶原%动力学常数%单链尿激酶型纤溶酶原激活剂%纯化%性质
纖溶酶原%動力學常數%單鏈尿激酶型纖溶酶原激活劑%純化%性質
섬용매원%동역학상수%단련뇨격매형섬용매원격활제%순화%성질
在溶栓研究中,纤溶酶原激活剂(plasminogen activator,PA)激活纤溶酶原(plasminogen,Plg)反应的动力学常数的测定占有重要地位.在前人的研究中,虽然进行了这项实验,但是并未给出一个方便、快捷的测定方法.所以建立一种更准确,更适合一般的实验室条件的PA分子激活Plg反应动力学常数的测定方法是必要的.在对该反应进行数学分析的基础上,得到由可测量表示的纤溶酶(plasmin,Plm)生成速度(v(Plm))的计算公式,由v(Plm)及相应已知量可进一步推导出K～Keat的表达式,最终测得相应动力学常数.用这种方法测定的由甲醇酵母(pichia pastoris)表达的人单链尿激酶型纤溶酶原激活剂(human single chain urokinase-PA,scu-PA)激活Plg的反应的Km=0.648 μmol@L-1,Kcat=0.0626 s-1,与文献报导相符(Km=0.4～1.1 μmol@L-1,Kcat=0.02～0.093)s-1,说明此方法是可靠的.又因该法只需相应底物及酶标仪且为连续测定,所以十分简便.
在溶栓研究中,纖溶酶原激活劑(plasminogen activator,PA)激活纖溶酶原(plasminogen,Plg)反應的動力學常數的測定佔有重要地位.在前人的研究中,雖然進行瞭這項實驗,但是併未給齣一箇方便、快捷的測定方法.所以建立一種更準確,更適閤一般的實驗室條件的PA分子激活Plg反應動力學常數的測定方法是必要的.在對該反應進行數學分析的基礎上,得到由可測量錶示的纖溶酶(plasmin,Plm)生成速度(v(Plm))的計算公式,由v(Plm)及相應已知量可進一步推導齣K～Keat的錶達式,最終測得相應動力學常數.用這種方法測定的由甲醇酵母(pichia pastoris)錶達的人單鏈尿激酶型纖溶酶原激活劑(human single chain urokinase-PA,scu-PA)激活Plg的反應的Km=0.648 μmol@L-1,Kcat=0.0626 s-1,與文獻報導相符(Km=0.4～1.1 μmol@L-1,Kcat=0.02～0.093)s-1,說明此方法是可靠的.又因該法隻需相應底物及酶標儀且為連續測定,所以十分簡便.
재용전연구중,섬용매원격활제(plasminogen activator,PA)격활섬용매원(plasminogen,Plg)반응적동역학상수적측정점유중요지위.재전인적연구중,수연진행료저항실험,단시병미급출일개방편、쾌첩적측정방법.소이건립일충경준학,경괄합일반적실험실조건적PA분자격활Plg반응동역학상수적측정방법시필요적.재대해반응진행수학분석적기출상,득도유가측량표시적섬용매(plasmin,Plm)생성속도(v(Plm))적계산공식,유v(Plm)급상응이지량가진일보추도출K～Keat적표체식,최종측득상응동역학상수.용저충방법측정적유갑순효모(pichia pastoris)표체적인단련뇨격매형섬용매원격활제(human single chain urokinase-PA,scu-PA)격활Plg적반응적Km=0.648 μmol@L-1,Kcat=0.0626 s-1,여문헌보도상부(Km=0.4～1.1 μmol@L-1,Kcat=0.02～0.093)s-1,설명차방법시가고적.우인해법지수상응저물급매표의차위련속측정,소이십분간편.
