中国兽医寄生虫病
中國獸醫寄生蟲病
중국수의기생충병
CHINESE JOURNAL OF VETERINARY PARASITOLOGY
2003年
2期
5-8
,共4页
弓形虫%常规PCR%巢式PCR%实验小鼠%方法比较
弓形蟲%常規PCR%巢式PCR%實驗小鼠%方法比較
궁형충%상규PCR%소식PCR%실험소서%방법비교
为了建立敏感、稳定、特异的PCR检测体系,用于实验动物弓形虫感染的检测.采用B1基因设计引物,建立常规PCR,用P30基因设计引物,建立巢式PCR;用两种PCR方法检测实验感染弓形虫小鼠血液和腹腔液中的DNA动态变化;用巢式PCR检测自然状态下的普通级豚鼠、教学和科研用兔的弓形虫感染率,并和常规PCR检测结果比较.结果,巢式PCR可检测到1fg DNA含量,比常规PCR敏感100倍;对其他微生物DNA无交叉现象,特异性强;对同一样品重复检测3次,阴、阳性结果一致,稳定性好.小鼠感染弓形虫2 d后,巢式PCR对小鼠腹腔液的阳性检出率为83.3%,对血液的阳性检出率为33.3%;感染3 d后,腹腔液阳性检出率为100%;而常规PCR在小鼠感染3 d和4 d后才能在腹腔液和血液中检测到,检出率各为16.7%.受检普通级豚鼠没有感染弓形虫,教学和科研用免的弓形虫总感染率为14.3%.结论认为,巢式PCR方法可用于实验动物弓形虫早期感染的检测,具有敏感性高、特异性强、稳定性好的特点.
為瞭建立敏感、穩定、特異的PCR檢測體繫,用于實驗動物弓形蟲感染的檢測.採用B1基因設計引物,建立常規PCR,用P30基因設計引物,建立巢式PCR;用兩種PCR方法檢測實驗感染弓形蟲小鼠血液和腹腔液中的DNA動態變化;用巢式PCR檢測自然狀態下的普通級豚鼠、教學和科研用兔的弓形蟲感染率,併和常規PCR檢測結果比較.結果,巢式PCR可檢測到1fg DNA含量,比常規PCR敏感100倍;對其他微生物DNA無交扠現象,特異性彊;對同一樣品重複檢測3次,陰、暘性結果一緻,穩定性好.小鼠感染弓形蟲2 d後,巢式PCR對小鼠腹腔液的暘性檢齣率為83.3%,對血液的暘性檢齣率為33.3%;感染3 d後,腹腔液暘性檢齣率為100%;而常規PCR在小鼠感染3 d和4 d後纔能在腹腔液和血液中檢測到,檢齣率各為16.7%.受檢普通級豚鼠沒有感染弓形蟲,教學和科研用免的弓形蟲總感染率為14.3%.結論認為,巢式PCR方法可用于實驗動物弓形蟲早期感染的檢測,具有敏感性高、特異性彊、穩定性好的特點.
위료건립민감、은정、특이적PCR검측체계,용우실험동물궁형충감염적검측.채용B1기인설계인물,건립상규PCR,용P30기인설계인물,건립소식PCR;용량충PCR방법검측실험감염궁형충소서혈액화복강액중적DNA동태변화;용소식PCR검측자연상태하적보통급돈서、교학화과연용토적궁형충감염솔,병화상규PCR검측결과비교.결과,소식PCR가검측도1fg DNA함량,비상규PCR민감100배;대기타미생물DNA무교차현상,특이성강;대동일양품중복검측3차,음、양성결과일치,은정성호.소서감염궁형충2 d후,소식PCR대소서복강액적양성검출솔위83.3%,대혈액적양성검출솔위33.3%;감염3 d후,복강액양성검출솔위100%;이상규PCR재소서감염3 d화4 d후재능재복강액화혈액중검측도,검출솔각위16.7%.수검보통급돈서몰유감염궁형충,교학화과연용면적궁형충총감염솔위14.3%.결론인위,소식PCR방법가용우실험동물궁형충조기감염적검측,구유민감성고、특이성강、은정성호적특점.
