武汉大学学报(医学版)
武漢大學學報(醫學版)
무한대학학보(의학판)
Wuhan University(Medical Edition)
2003年
1期
21-23,34
,共4页
申志发%王宇哲%孙军%宗义强%屈伸
申誌髮%王宇哲%孫軍%宗義彊%屈伸
신지발%왕우철%손군%종의강%굴신
鸡贫血病毒%基因克隆%细胞凋亡%VP3基因
鷄貧血病毒%基因剋隆%細胞凋亡%VP3基因
계빈혈병독%기인극륭%세포조망%VP3기인
目的:观察CAV、VP3基因在H22细胞中的凋亡诱导情况.方法:用PCR方法扩增了鸡贫血病毒标准株的VP3基因,并将其克隆于真核表达载体pcDNA3上,构建含VP3基因的重组体;在体外,利用Lipofect AMINETM介导的基因转染法,将pcDNA-VP3、pcDNA3分别转入小鼠腹水型肝癌细胞系H22中,RT-PCR法检测VP3基因在细胞中的表达状况.同时利用流式细胞检测术验证VP3基因诱导死亡的方式.结果:酶切鉴定及测序分析表明,插入片段和预期相符,阳性重组体被命名为pcDNA-VP3;RT-PCR结果表明,转染后,VP3基因在细胞中得到了表达;同时DNA直方图也证实鸡贫血病毒的VP3基因确以凋亡的方式诱导细胞死亡.
目的:觀察CAV、VP3基因在H22細胞中的凋亡誘導情況.方法:用PCR方法擴增瞭鷄貧血病毒標準株的VP3基因,併將其剋隆于真覈錶達載體pcDNA3上,構建含VP3基因的重組體;在體外,利用Lipofect AMINETM介導的基因轉染法,將pcDNA-VP3、pcDNA3分彆轉入小鼠腹水型肝癌細胞繫H22中,RT-PCR法檢測VP3基因在細胞中的錶達狀況.同時利用流式細胞檢測術驗證VP3基因誘導死亡的方式.結果:酶切鑒定及測序分析錶明,插入片段和預期相符,暘性重組體被命名為pcDNA-VP3;RT-PCR結果錶明,轉染後,VP3基因在細胞中得到瞭錶達;同時DNA直方圖也證實鷄貧血病毒的VP3基因確以凋亡的方式誘導細胞死亡.
목적:관찰CAV、VP3기인재H22세포중적조망유도정황.방법:용PCR방법확증료계빈혈병독표준주적VP3기인,병장기극륭우진핵표체재체pcDNA3상,구건함VP3기인적중조체;재체외,이용Lipofect AMINETM개도적기인전염법,장pcDNA-VP3、pcDNA3분별전입소서복수형간암세포계H22중,RT-PCR법검측VP3기인재세포중적표체상황.동시이용류식세포검측술험증VP3기인유도사망적방식.결과:매절감정급측서분석표명,삽입편단화예기상부,양성중조체피명명위pcDNA-VP3;RT-PCR결과표명,전염후,VP3기인재세포중득도료표체;동시DNA직방도야증실계빈혈병독적VP3기인학이조망적방식유도세포사망.
