自然科学进展
自然科學進展
자연과학진전
zirankexuejinzhan
2002年
12期
1263-1267
,共5页
李茂林%杨新林%朱鹤孙%王俐勇
李茂林%楊新林%硃鶴孫%王俐勇
리무림%양신림%주학손%왕리용
反义核酸%凝血因子ⅧC%生物活性材料%血管内皮细胞
反義覈痠%凝血因子ⅧC%生物活性材料%血管內皮細胞
반의핵산%응혈인자ⅧC%생물활성재료%혈관내피세포
利用人工合成的部分反义核酸ⅧC(以pⅧC表示)用以构建含有部分反义凝血因子基因片段的真核表达质粒pXJ41-neo/pⅧC,再用磷酸钙介导转染血管内皮细胞,筛选出阳性克隆血管内皮细胞,扩大培养转基因细胞,用金黄色葡萄球菌凝集试验和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测转基因细胞ⅧC蛋白质的表达水平.结果表明所构件人工合成的部分反义核酸pⅧC真核表达载体能有效抑制人的凝血因子ⅧC的表达,因此建立了有效表达反义核酸pⅧC的血管内皮细胞模型.
利用人工閤成的部分反義覈痠ⅧC(以pⅧC錶示)用以構建含有部分反義凝血因子基因片段的真覈錶達質粒pXJ41-neo/pⅧC,再用燐痠鈣介導轉染血管內皮細胞,篩選齣暘性剋隆血管內皮細胞,擴大培養轉基因細胞,用金黃色葡萄毬菌凝集試驗和酶聯免疫吸附試驗(ELISA)檢測轉基因細胞ⅧC蛋白質的錶達水平.結果錶明所構件人工閤成的部分反義覈痠pⅧC真覈錶達載體能有效抑製人的凝血因子ⅧC的錶達,因此建立瞭有效錶達反義覈痠pⅧC的血管內皮細胞模型.
이용인공합성적부분반의핵산ⅧC(이pⅧC표시)용이구건함유부분반의응혈인자기인편단적진핵표체질립pXJ41-neo/pⅧC,재용린산개개도전염혈관내피세포,사선출양성극륭혈관내피세포,확대배양전기인세포,용금황색포도구균응집시험화매련면역흡부시험(ELISA)검측전기인세포ⅧC단백질적표체수평.결과표명소구건인공합성적부분반의핵산pⅧC진핵표체재체능유효억제인적응혈인자ⅧC적표체,인차건립료유효표체반의핵산pⅧC적혈관내피세포모형.
