中国公共卫生
中國公共衛生
중국공공위생
CHINA PUBLIC HEALTH
2002年
5期
533-534
,共2页
甘晓榕%王小琴%Michel-Angelo Sciotti%Joelle A.Ogier
甘曉榕%王小琴%Michel-Angelo Sciotti%Joelle A.Ogier
감효용%왕소금%Michel-Angelo Sciotti%Joelle A.Ogier
变形链球菌%表面蛋白%基因克隆%诱导表达
變形鏈毬菌%錶麵蛋白%基因剋隆%誘導錶達
변형련구균%표면단백%기인극륭%유도표체
目的分离变形链球菌表面蛋白可变区(V+)基因,构建V+表达克隆.方法用PCR从sr基因中扩增目的基因片段V(+),亚克隆入中间载体pCR2.1和表达载体pET21a(+).对重组体进行诱导表达并对表达产物进行SDS-PAGE和Western blotting分析.结果 PCR扩增产物为1.16kb的DNA带,亚克隆入载体,获得重组克隆pCVf和重组表达克隆pSRVf,表达产物为43kDa抗原,可以被抗Ⅰ/Ⅱ抗体特异性地识别.结论本试验成功地构建了携带V+基因片段的表达克隆pSRVf.
目的分離變形鏈毬菌錶麵蛋白可變區(V+)基因,構建V+錶達剋隆.方法用PCR從sr基因中擴增目的基因片段V(+),亞剋隆入中間載體pCR2.1和錶達載體pET21a(+).對重組體進行誘導錶達併對錶達產物進行SDS-PAGE和Western blotting分析.結果 PCR擴增產物為1.16kb的DNA帶,亞剋隆入載體,穫得重組剋隆pCVf和重組錶達剋隆pSRVf,錶達產物為43kDa抗原,可以被抗Ⅰ/Ⅱ抗體特異性地識彆.結論本試驗成功地構建瞭攜帶V+基因片段的錶達剋隆pSRVf.
목적분리변형련구균표면단백가변구(V+)기인,구건V+표체극륭.방법용PCR종sr기인중확증목적기인편단V(+),아극륭입중간재체pCR2.1화표체재체pET21a(+).대중조체진행유도표체병대표체산물진행SDS-PAGE화Western blotting분석.결과 PCR확증산물위1.16kb적DNA대,아극륭입재체,획득중조극륭pCVf화중조표체극륭pSRVf,표체산물위43kDa항원,가이피항Ⅰ/Ⅱ항체특이성지식별.결론본시험성공지구건료휴대V+기인편단적표체극륭pSRVf.