中国实验血液学杂志
中國實驗血液學雜誌
중국실험혈액학잡지
JOURNAL OF EXPERIMENTAL HEMATOLOGY
2002年
2期
126-130
,共5页
林宁晶%朱平%张野坪%石永进%张新%卜定方%董玉君
林寧晶%硃平%張野坪%石永進%張新%蔔定方%董玉君
림저정%주평%장야평%석영진%장신%복정방%동옥군
基因组DNA%独特型核酸疫苗%B细胞淋巴瘤%体液免疫
基因組DNA%獨特型覈痠疫苗%B細胞淋巴瘤%體液免疫
기인조DNA%독특형핵산역묘%B세포림파류%체액면역
本研究观察从人B细胞淋巴瘤细胞系基因组DNA及RNA分别构建的表达载体作为核酸疫苗诱导小鼠产生抗肿瘤免疫反应的情况.分别提取人B淋巴瘤细胞系Namalwa细胞的基因组DNA及RNA,将免疫球蛋白重链可变区(IgHV)基因片段克隆到pcDNA 3.0真核表达载体中作为独特型核酸疫苗,其中DNA来源的核酸疫苗用LfpofectAMINE转染COS细胞,然后用RT-PCR观察转录及剪接的情况.两种不同来源的核酸疫苗分别肌内注射免疫小鼠后,用间接免疫荧光法检测抗独特型抗体的生成.结果发现,基因组DNA来源的核酸疫苗在COS细胞中能成功地转录,转录产物大小为477 bp,其中86 bp的内含子区域被剪接;两种疫苗免疫动物后均可诱导针对Namalwa细胞特异的抗独特型抗体,并于第6周达高峰.结论提示,淋巴瘤基因组DNA和RNA来源的IgHV基因片段均可制备核酸疫苗,能诱发小鼠产生抗淋巴瘤免疫反应.
本研究觀察從人B細胞淋巴瘤細胞繫基因組DNA及RNA分彆構建的錶達載體作為覈痠疫苗誘導小鼠產生抗腫瘤免疫反應的情況.分彆提取人B淋巴瘤細胞繫Namalwa細胞的基因組DNA及RNA,將免疫毬蛋白重鏈可變區(IgHV)基因片段剋隆到pcDNA 3.0真覈錶達載體中作為獨特型覈痠疫苗,其中DNA來源的覈痠疫苗用LfpofectAMINE轉染COS細胞,然後用RT-PCR觀察轉錄及剪接的情況.兩種不同來源的覈痠疫苗分彆肌內註射免疫小鼠後,用間接免疫熒光法檢測抗獨特型抗體的生成.結果髮現,基因組DNA來源的覈痠疫苗在COS細胞中能成功地轉錄,轉錄產物大小為477 bp,其中86 bp的內含子區域被剪接;兩種疫苗免疫動物後均可誘導針對Namalwa細胞特異的抗獨特型抗體,併于第6週達高峰.結論提示,淋巴瘤基因組DNA和RNA來源的IgHV基因片段均可製備覈痠疫苗,能誘髮小鼠產生抗淋巴瘤免疫反應.
본연구관찰종인B세포림파류세포계기인조DNA급RNA분별구건적표체재체작위핵산역묘유도소서산생항종류면역반응적정황.분별제취인B림파류세포계Namalwa세포적기인조DNA급RNA,장면역구단백중련가변구(IgHV)기인편단극륭도pcDNA 3.0진핵표체재체중작위독특형핵산역묘,기중DNA래원적핵산역묘용LfpofectAMINE전염COS세포,연후용RT-PCR관찰전록급전접적정황.량충불동래원적핵산역묘분별기내주사면역소서후,용간접면역형광법검측항독특형항체적생성.결과발현,기인조DNA래원적핵산역묘재COS세포중능성공지전록,전록산물대소위477 bp,기중86 bp적내함자구역피전접;량충역묘면역동물후균가유도침대Namalwa세포특이적항독특형항체,병우제6주체고봉.결론제시,림파류기인조DNA화RNA래원적IgHV기인편단균가제비핵산역묘,능유발소서산생항림파류면역반응.
