中国病毒学
中國病毒學
중국병독학
VIROLOGICA SINICA
2004年
1期
18-21
,共4页
花群义%张念祖%董俊%杨晶焰%徐自忠%杨云庆
花群義%張唸祖%董俊%楊晶燄%徐自忠%楊雲慶
화군의%장념조%동준%양정염%서자충%양운경
赤羽病病毒%核蛋白基因%克隆与序列分析
赤羽病病毒%覈蛋白基因%剋隆與序列分析
적우병병독%핵단백기인%극륭여서렬분석
参考GeneBank发表的赤羽病病毒(Akabane virus,AKAV)的核蛋白基因(SmRNA)序列,设计合成一对引物,从分离自牛体的AKAV BHK21细胞培养物中提取总RNA,对AKAV核蛋白基因进行RT-PCR扩增,产物经琼脂糖电泳分析,呈现一条约696bp的条带,回收纯化后,将其克隆至pMD18-T质粒载体中,然后进行核苷酸序列分析.与GenBank中报道的多株AKAV编码核衣壳蛋白(N)的SmRNA基因比较后发现,与其它株的核苷酸的同源性为94.2%～98.3%,推导的氨基酸的同源性为97.6%～100%,证实为AKV的N基因.为生产AKAV特异性核蛋白抗原、免疫血清学诊断试剂的制备和分子生物学研究打下了坚实基础.
參攷GeneBank髮錶的赤羽病病毒(Akabane virus,AKAV)的覈蛋白基因(SmRNA)序列,設計閤成一對引物,從分離自牛體的AKAV BHK21細胞培養物中提取總RNA,對AKAV覈蛋白基因進行RT-PCR擴增,產物經瓊脂糖電泳分析,呈現一條約696bp的條帶,迴收純化後,將其剋隆至pMD18-T質粒載體中,然後進行覈苷痠序列分析.與GenBank中報道的多株AKAV編碼覈衣殼蛋白(N)的SmRNA基因比較後髮現,與其它株的覈苷痠的同源性為94.2%～98.3%,推導的氨基痠的同源性為97.6%～100%,證實為AKV的N基因.為生產AKAV特異性覈蛋白抗原、免疫血清學診斷試劑的製備和分子生物學研究打下瞭堅實基礎.
삼고GeneBank발표적적우병병독(Akabane virus,AKAV)적핵단백기인(SmRNA)서렬,설계합성일대인물,종분리자우체적AKAV BHK21세포배양물중제취총RNA,대AKAV핵단백기인진행RT-PCR확증,산물경경지당전영분석,정현일조약696bp적조대,회수순화후,장기극륭지pMD18-T질립재체중,연후진행핵감산서렬분석.여GenBank중보도적다주AKAV편마핵의각단백(N)적SmRNA기인비교후발현,여기타주적핵감산적동원성위94.2%～98.3%,추도적안기산적동원성위97.6%～100%,증실위AKV적N기인.위생산AKAV특이성핵단백항원、면역혈청학진단시제적제비화분자생물학연구타하료견실기출.
