中国药科大学学报
中國藥科大學學報
중국약과대학학보
JOURNAL OF CHINA PHARMACEUTICAL UNIVERSITY
2006年
3期
273-276
,共4页
周红霞%周梅仙%吴洁%胡卓逸%刘景晶
週紅霞%週梅仙%吳潔%鬍卓逸%劉景晶
주홍하%주매선%오길%호탁일%류경정
血管内皮生长因子%突变体%纯化%免疫原性%抗肿瘤
血管內皮生長因子%突變體%純化%免疫原性%抗腫瘤
혈관내피생장인자%돌변체%순화%면역원성%항종류
目的:为获得大量人源血管内皮生长因子突变体(hVEGF121′)的重组蛋白,本文研究了其发酵条件,分离纯化方法,并初步考察了其生物活性.方法:应用PCR介导的定点突变方法,将hVEGF121中对其活性影响较小的1～8位和115～121位两个肽段替换成破伤风毒素(TT)的两个强表位肽段618～627位和831～837位,构建高效表达的pET28a/hVEGF121′重组质粒,考察诱导条件对目的蛋白表达量的影响;所得包含体经过DEAE-Cellulose离子交换柱纯化;初步比较了VEGF121和突变体VEGF121′的免疫和抗肿瘤效果.结果:最佳表达条件为:乳糖诱导时间6 h,诱导浓度2 mmol/L;离子交换纯化后可得到电泳纯的突变体hVEGF121′;初步的动物免疫发现突变体VEGF121′和VEGF121有相近的免疫滴度,但前者抗肿瘤效果更显著.结论:经发酵纯化后得到重组人源血管内皮生长因子突变体(hVEGF121′)的纯品,并初步展现良好的抗肿瘤效果.
目的:為穫得大量人源血管內皮生長因子突變體(hVEGF121′)的重組蛋白,本文研究瞭其髮酵條件,分離純化方法,併初步攷察瞭其生物活性.方法:應用PCR介導的定點突變方法,將hVEGF121中對其活性影響較小的1～8位和115～121位兩箇肽段替換成破傷風毒素(TT)的兩箇彊錶位肽段618～627位和831～837位,構建高效錶達的pET28a/hVEGF121′重組質粒,攷察誘導條件對目的蛋白錶達量的影響;所得包含體經過DEAE-Cellulose離子交換柱純化;初步比較瞭VEGF121和突變體VEGF121′的免疫和抗腫瘤效果.結果:最佳錶達條件為:乳糖誘導時間6 h,誘導濃度2 mmol/L;離子交換純化後可得到電泳純的突變體hVEGF121′;初步的動物免疫髮現突變體VEGF121′和VEGF121有相近的免疫滴度,但前者抗腫瘤效果更顯著.結論:經髮酵純化後得到重組人源血管內皮生長因子突變體(hVEGF121′)的純品,併初步展現良好的抗腫瘤效果.
목적:위획득대량인원혈관내피생장인자돌변체(hVEGF121′)적중조단백,본문연구료기발효조건,분리순화방법,병초보고찰료기생물활성.방법:응용PCR개도적정점돌변방법,장hVEGF121중대기활성영향교소적1～8위화115～121위량개태단체환성파상풍독소(TT)적량개강표위태단618～627위화831～837위,구건고효표체적pET28a/hVEGF121′중조질립,고찰유도조건대목적단백표체량적영향;소득포함체경과DEAE-Cellulose리자교환주순화;초보비교료VEGF121화돌변체VEGF121′적면역화항종류효과.결과:최가표체조건위:유당유도시간6 h,유도농도2 mmol/L;리자교환순화후가득도전영순적돌변체hVEGF121′;초보적동물면역발현돌변체VEGF121′화VEGF121유상근적면역적도,단전자항종류효과경현저.결론:경발효순화후득도중조인원혈관내피생장인자돌변체(hVEGF121′)적순품,병초보전현량호적항종류효과.
