动物医学进展
動物醫學進展
동물의학진전
PROGRESS IN VETERINARY MEDICINE
2007年
4期
9-13
,共5页
程太平%荣俊%刘晓娜%邹浩勇%齐晓亮%樊友净
程太平%榮俊%劉曉娜%鄒浩勇%齊曉亮%樊友淨
정태평%영준%류효나%추호용%제효량%번우정
传染性法氏囊病病毒%pBV220%表达优化%大肠埃希菌BL21
傳染性法氏囊病病毒%pBV220%錶達優化%大腸埃希菌BL21
전염성법씨낭병병독%pBV220%표체우화%대장애희균BL21
采用三角瓶小量法振荡培养,对含传染性法氏囊病病毒VP2基因的重组质粒pBV220在大肠埃希菌BL21内表达条件进行优化.在37℃时诱导,对起始OD600值(0.40±0.025～0.65±0.025)进行筛选;在42℃时诱导,对起始OD600值(0.40±0.025～0.65±0.025)进行筛选;在37℃和42℃时诱导,分别对诱导时间(5、6、7、8 h)及待选培养基(R1、R2、R3)进行筛选.以菌体湿重和菌体VP2蛋白表达水平两个指标进行统计分析及综合评价.结果表明,37℃时诱导,最适宜起始OD600为0.45±0.025,最佳诱导时间为7 h,最佳培养基是R1;42℃时诱导,最适宜起始OD600为0.40±0.025,最佳诱导时间为5 h,最佳培养基是R2.42℃时的每一诱导时间组菌体湿重和VP2表达水平都显著低于37℃时.因此,以重组质粒pBV220的大肠埃希菌BL21表达IBDV VP2基因,在37℃时诱导表达要比42℃时好.
採用三角瓶小量法振盪培養,對含傳染性法氏囊病病毒VP2基因的重組質粒pBV220在大腸埃希菌BL21內錶達條件進行優化.在37℃時誘導,對起始OD600值(0.40±0.025～0.65±0.025)進行篩選;在42℃時誘導,對起始OD600值(0.40±0.025～0.65±0.025)進行篩選;在37℃和42℃時誘導,分彆對誘導時間(5、6、7、8 h)及待選培養基(R1、R2、R3)進行篩選.以菌體濕重和菌體VP2蛋白錶達水平兩箇指標進行統計分析及綜閤評價.結果錶明,37℃時誘導,最適宜起始OD600為0.45±0.025,最佳誘導時間為7 h,最佳培養基是R1;42℃時誘導,最適宜起始OD600為0.40±0.025,最佳誘導時間為5 h,最佳培養基是R2.42℃時的每一誘導時間組菌體濕重和VP2錶達水平都顯著低于37℃時.因此,以重組質粒pBV220的大腸埃希菌BL21錶達IBDV VP2基因,在37℃時誘導錶達要比42℃時好.
채용삼각병소량법진탕배양,대함전염성법씨낭병병독VP2기인적중조질립pBV220재대장애희균BL21내표체조건진행우화.재37℃시유도,대기시OD600치(0.40±0.025～0.65±0.025)진행사선;재42℃시유도,대기시OD600치(0.40±0.025～0.65±0.025)진행사선;재37℃화42℃시유도,분별대유도시간(5、6、7、8 h)급대선배양기(R1、R2、R3)진행사선.이균체습중화균체VP2단백표체수평량개지표진행통계분석급종합평개.결과표명,37℃시유도,최괄의기시OD600위0.45±0.025,최가유도시간위7 h,최가배양기시R1;42℃시유도,최괄의기시OD600위0.40±0.025,최가유도시간위5 h,최가배양기시R2.42℃시적매일유도시간조균체습중화VP2표체수평도현저저우37℃시.인차,이중조질립pBV220적대장애희균BL21표체IBDV VP2기인,재37℃시유도표체요비42℃시호.
