CAJ | 학술논문

目的:分析幽门螺杆菌(H pylori)与人胃腺癌上皮细胞(human gastric adenocarcinoma epithelial,AGs)的相互作用蛋白质组学差异.方法:采用双向凝胶电泳分离H pylori 26695株与AGS细胞相互作用0.5、2、4 h时间点的细胞和黏附茵的全蛋白样品,考马斯亮兰染色,ImageMster 2D图像分析软件比较分析,识别差异蛋白,将差异蛋白点进行胶内酶解,经基质辅助电离解析飞行时间质谱(MALDITOF-TOF/MS)获得肽质量指纹图谱(PMF),通过搜寻蛋白质数据库完成对差异蛋白的鉴定.结果:对0.5、2、4 h时间点图谱差异蛋白点分析共发现主要差异蛋白点66个,对其中34个(共对应16种蛋白)最终完成准确鉴定,2 h后8种蛋白开始上调,其中2种是细胞来源,6种H pylori来源;4 h时4种细胞来源蛋白下调,并有4种新的蛋白开始被观察到.在共感染的早期,细胞的琥珀酸脱氢酶、H pylori的抗氧化酶类、黏附素以及HSP 60表达上调.感染晚期主要是细胞来源的亲环素A、新生多肽相关复合物a多肽开始表达,H pylori来源的尿素酶、非血红素铁蛋白等蛋白明显出现在黏附茵成分中.结论:H pylori与AGS细胞相互作用过程中,细菌和细胞蛋白表达均存在明显时序性变化,早期相互作用则主要表现为以与黏附等有关的蛋白表达变化,后期向有利细菌存活和增殖的方向发展,并呈现出与免疫逃逸和病理损伤相关的变化.
목적:분석유문라간균(H pylori)여인위선암상피세포(human gastric adenocarcinoma epithelial,AGs)적상호작용단백질조학차이.방법:채용쌍향응효전영분리H pylori 26695주여AGS세포상호작용0.5、2、4 h시간점적세포화점부인적전단백양품,고마사량란염색,ImageMster 2D도상분석연건비교분석,식별차이단백,장차이단백점진행효내매해,경기질보조전리해석비행시간질보(MALDITOF-TOF/MS)획득태질량지문도보(PMF),통과수심단백질수거고완성대차이단백적감정.결과:대0.5、2、4 h시간점도보차이단백점분석공발현주요차이단백점66개,대기중34개(공대응16충단백)최종완성준학감정,2 h후8충단백개시상조,기중2충시세포래원,6충H pylori래원;4 h시4충세포래원단백하조,병유4충신적단백개시피관찰도.재공감염적조기,세포적호박산탈경매、H pylori적항양화매류、점부소이급HSP 60표체상조.감염만기주요시세포래원적친배소A、신생다태상관복합물a다태개시표체,H pylori래원적뇨소매、비혈홍소철단백등단백명현출현재점부인성분중.결론:H pylori여AGS세포상호작용과정중,세균화세포단백표체균존재명현시서성변화,조기상호작용칙주요표현위이여점부등유관적단백표체변화,후기향유리세균존활화증식적방향발전,병정현출여면역도일화병리손상상관적변화.