中国兽医科学
中國獸醫科學
중국수의과학
VETERINARY SCIENCE IN CHINA
2009年
8期
707-711
,共5页
董慧%焦新安%殷月兰%田德斌%潘志明%刘松婷%方丽君
董慧%焦新安%慇月蘭%田德斌%潘誌明%劉鬆婷%方麗君
동혜%초신안%은월란%전덕빈%반지명%류송정%방려군
结核病%结核分枝杆菌%产单核细胞李斯特菌%同源重组
結覈病%結覈分枝桿菌%產單覈細胞李斯特菌%同源重組
결핵병%결핵분지간균%산단핵세포리사특균%동원중조
对编码结核分枝杆菌抗原Ag85B和ESAT-6的基因片段进行了扩增,并将其克隆入穿梭载体DKSV7,利用基因同源重组技术构建了表达结核分枝杆菌抗原Ag85B和ESAT-6的重组产单核细胞李斯特菌(LM).结果表明,外源基因成功整合入LM基因组并获得转录;Western-blot分析结果显示,重组菌携带的外源基因在动物体内能够表达;溶血试验与细胞感染试验表明,较之野生型李斯特菌,外源基因的插入破坏了重组菌LM(pKSV7-H85-6B)的溶血活性,显著降低了对细胞的侵袭能力.证实,携带结核分枝杆菌保护性抗原Ag85B和ESAT-6的重组李斯特菌对结核病新型疫苗的研究具有潜在应用价值.
對編碼結覈分枝桿菌抗原Ag85B和ESAT-6的基因片段進行瞭擴增,併將其剋隆入穿梭載體DKSV7,利用基因同源重組技術構建瞭錶達結覈分枝桿菌抗原Ag85B和ESAT-6的重組產單覈細胞李斯特菌(LM).結果錶明,外源基因成功整閤入LM基因組併穫得轉錄;Western-blot分析結果顯示,重組菌攜帶的外源基因在動物體內能夠錶達;溶血試驗與細胞感染試驗錶明,較之野生型李斯特菌,外源基因的插入破壞瞭重組菌LM(pKSV7-H85-6B)的溶血活性,顯著降低瞭對細胞的侵襲能力.證實,攜帶結覈分枝桿菌保護性抗原Ag85B和ESAT-6的重組李斯特菌對結覈病新型疫苗的研究具有潛在應用價值.
대편마결핵분지간균항원Ag85B화ESAT-6적기인편단진행료확증,병장기극륭입천사재체DKSV7,이용기인동원중조기술구건료표체결핵분지간균항원Ag85B화ESAT-6적중조산단핵세포리사특균(LM).결과표명,외원기인성공정합입LM기인조병획득전록;Western-blot분석결과현시,중조균휴대적외원기인재동물체내능구표체;용혈시험여세포감염시험표명,교지야생형리사특균,외원기인적삽입파배료중조균LM(pKSV7-H85-6B)적용혈활성,현저강저료대세포적침습능력.증실,휴대결핵분지간균보호성항원Ag85B화ESAT-6적중조리사특균대결핵병신형역묘적연구구유잠재응용개치.
