广东医学
廣東醫學
엄동의학
GUNAGDONG MEDICAL JOURNAL
2011年
13期
1738-1740
,共3页
曾军荣%李榕娇%王瑜玲%陈永强%邝炽庄%孙慧冰
曾軍榮%李榕嬌%王瑜玲%陳永彊%鄺熾莊%孫慧冰
증군영%리용교%왕유령%진영강%광치장%손혜빙
星状病毒%轮状病毒%肠道腺病毒%诺如病毒%多重荧光RT-PCR
星狀病毒%輪狀病毒%腸道腺病毒%諾如病毒%多重熒光RT-PCR
성상병독%륜상병독%장도선병독%낙여병독%다중형광RT-PCR
目的 建立能同时检测病毒性腹泻患者粪便中星状病毒(astrovirus)、A族轮状病毒(group A rotavirus)、肠道腺病毒(enteric adenovirus)、诺如病毒 GⅠ/GⅡ(norovirus GⅠ/GⅡ)的多重荧光RT-PCR方法.方法 根据各病毒基因组保守性序列设计引物和探针,建立多重荧光RT-PCR检测方法.对建立的多重荧光RT-PCR方法 进行特异性、敏感性及灵敏性实验,并使用该法对256份病毒性腹泻粪便标本进行检测,同时使用基因测序进行验证.结果 成功建立常见腹泻病毒的多重荧光RT-PCR检测方法,对星状病毒、轮状病毒、肠道腺病毒、诺如病毒以外的病原体不发生扩增反应.该法检测星状病毒、轮状病毒、肠道腺病毒、诺如病毒的灵敏度可达500 copies/mL.256份标本中:星状病毒、轮状病毒、肠道腺病毒和诺如病毒阳性率分别为3.12%(8/256)、42.97%(110/256)、9.38%(24/256)和10.16%(26/256),与基因测序方法 检测结果 符合率达到100%.结论 该多重荧光RT-PCR检测方法 具有快速、灵敏、特异的优点,可用于临床病原诊断.
目的 建立能同時檢測病毒性腹瀉患者糞便中星狀病毒(astrovirus)、A族輪狀病毒(group A rotavirus)、腸道腺病毒(enteric adenovirus)、諾如病毒 GⅠ/GⅡ(norovirus GⅠ/GⅡ)的多重熒光RT-PCR方法.方法 根據各病毒基因組保守性序列設計引物和探針,建立多重熒光RT-PCR檢測方法.對建立的多重熒光RT-PCR方法 進行特異性、敏感性及靈敏性實驗,併使用該法對256份病毒性腹瀉糞便標本進行檢測,同時使用基因測序進行驗證.結果 成功建立常見腹瀉病毒的多重熒光RT-PCR檢測方法,對星狀病毒、輪狀病毒、腸道腺病毒、諾如病毒以外的病原體不髮生擴增反應.該法檢測星狀病毒、輪狀病毒、腸道腺病毒、諾如病毒的靈敏度可達500 copies/mL.256份標本中:星狀病毒、輪狀病毒、腸道腺病毒和諾如病毒暘性率分彆為3.12%(8/256)、42.97%(110/256)、9.38%(24/256)和10.16%(26/256),與基因測序方法 檢測結果 符閤率達到100%.結論 該多重熒光RT-PCR檢測方法 具有快速、靈敏、特異的優點,可用于臨床病原診斷.
목적 건립능동시검측병독성복사환자분편중성상병독(astrovirus)、A족륜상병독(group A rotavirus)、장도선병독(enteric adenovirus)、낙여병독 GⅠ/GⅡ(norovirus GⅠ/GⅡ)적다중형광RT-PCR방법.방법 근거각병독기인조보수성서렬설계인물화탐침,건립다중형광RT-PCR검측방법.대건립적다중형광RT-PCR방법 진행특이성、민감성급령민성실험,병사용해법대256빈병독성복사분편표본진행검측,동시사용기인측서진행험증.결과 성공건립상견복사병독적다중형광RT-PCR검측방법,대성상병독、륜상병독、장도선병독、낙여병독이외적병원체불발생확증반응.해법검측성상병독、륜상병독、장도선병독、낙여병독적령민도가체500 copies/mL.256빈표본중:성상병독、륜상병독、장도선병독화낙여병독양성솔분별위3.12%(8/256)、42.97%(110/256)、9.38%(24/256)화10.16%(26/256),여기인측서방법 검측결과 부합솔체도100%.결론 해다중형광RT-PCR검측방법 구유쾌속、령민、특이적우점,가용우림상병원진단.
