微生物学杂志
微生物學雜誌
미생물학잡지
JOURNAL OF MICROBIOLOGY
2011年
3期
6-11
,共6页
李洁琼%王利兵%刘阳%郑世学%喻子牛
李潔瓊%王利兵%劉暘%鄭世學%喻子牛
리길경%왕리병%류양%정세학%유자우
粘红酵母%ACC基因%克隆%CT功能域%原核表达
粘紅酵母%ACC基因%剋隆%CT功能域%原覈錶達
점홍효모%ACC기인%극륭%CT공능역%원핵표체
利用简并PCR结合染色体步移法首次克隆获得粘红酵母乙酰辅酶A羧化酶(ACC)基因的全长序列信息.序列分析表明,该基因包含2个内含子,分别位于42～147 bp和315～677 bp处,编码区域总长为6 801bp,推导的氨基酸序列进行二级结构分析具备乙酰辅酶A羧化酶典型的3个功能域:生物素羧化酶(BC)、生物素羧基载体蛋白(BCCP)和羧基转移酶(CT).克隆该基因的CT功能域基因,连接到原核表达载体pET-28a上,在Escherichia coli BL21(DE3)中成功表达,利用Ni-NTA树脂柱纯化获得CT的可溶性重组蛋白,浓度为1.8mg/mL,为研究ACC的功能和针对CT作用的除草亮机理研究提供了有价值的材料.
利用簡併PCR結閤染色體步移法首次剋隆穫得粘紅酵母乙酰輔酶A羧化酶(ACC)基因的全長序列信息.序列分析錶明,該基因包含2箇內含子,分彆位于42～147 bp和315～677 bp處,編碼區域總長為6 801bp,推導的氨基痠序列進行二級結構分析具備乙酰輔酶A羧化酶典型的3箇功能域:生物素羧化酶(BC)、生物素羧基載體蛋白(BCCP)和羧基轉移酶(CT).剋隆該基因的CT功能域基因,連接到原覈錶達載體pET-28a上,在Escherichia coli BL21(DE3)中成功錶達,利用Ni-NTA樹脂柱純化穫得CT的可溶性重組蛋白,濃度為1.8mg/mL,為研究ACC的功能和針對CT作用的除草亮機理研究提供瞭有價值的材料.
이용간병PCR결합염색체보이법수차극륭획득점홍효모을선보매A최화매(ACC)기인적전장서렬신식.서렬분석표명,해기인포함2개내함자,분별위우42～147 bp화315～677 bp처,편마구역총장위6 801bp,추도적안기산서렬진행이급결구분석구비을선보매A최화매전형적3개공능역:생물소최화매(BC)、생물소최기재체단백(BCCP)화최기전이매(CT).극륭해기인적CT공능역기인,련접도원핵표체재체pET-28a상,재Escherichia coli BL21(DE3)중성공표체,이용Ni-NTA수지주순화획득CT적가용성중조단백,농도위1.8mg/mL,위연구ACC적공능화침대CT작용적제초량궤리연구제공료유개치적재료.
