国际遗传学杂志
國際遺傳學雜誌
국제유전학잡지
INTERNATIONAL JOURNAL OF GENETICS
2007年
3期
161-164,183
,共5页
孙凌宇%赵亮%薛英威%赵育桢%白静%傅松滨%张岂凡
孫凌宇%趙亮%薛英威%趙育楨%白靜%傅鬆濱%張豈凡
손릉우%조량%설영위%조육정%백정%부송빈%장기범
胃癌%环氧合酶-2%RNA干扰%基因治疗
胃癌%環氧閤酶-2%RNA榦擾%基因治療
위암%배양합매-2%RNA간우%기인치료
目的 研究应用RNA干扰技术进行抑制胃癌SGC-7901细胞COX-2的表达研究.方法 依据siRNA设计原则,针对人COX-2的Mrna序列,设计并合成3条21 bp的双链RNA,瞬时转染人胃癌细胞SGC-7901,Western印迹t验证基因沉默效率以筛选合适的siRNA序列;根据筛选出的有效序列,合成编码短发卡RNA的双链寡核苷酸,定向克隆到含有U6 RNA聚合酶Ⅲ启动子的pSilencerTM2.1-U6 neo真核表达载体,稳定转染胃癌细胞SGC-7901中,经G418筛选,获得克隆细胞.结果 筛选出一条有效的干扰序列,位于291～311 bp,成功构建表达载体,COX-2在蛋白水平的表达明显被抑制.结论 利用化学合成siRNA进行初筛,再构建shRNA表达载体,可快速实现目的基因的表达抑制.
目的 研究應用RNA榦擾技術進行抑製胃癌SGC-7901細胞COX-2的錶達研究.方法 依據siRNA設計原則,針對人COX-2的Mrna序列,設計併閤成3條21 bp的雙鏈RNA,瞬時轉染人胃癌細胞SGC-7901,Western印跡t驗證基因沉默效率以篩選閤適的siRNA序列;根據篩選齣的有效序列,閤成編碼短髮卡RNA的雙鏈寡覈苷痠,定嚮剋隆到含有U6 RNA聚閤酶Ⅲ啟動子的pSilencerTM2.1-U6 neo真覈錶達載體,穩定轉染胃癌細胞SGC-7901中,經G418篩選,穫得剋隆細胞.結果 篩選齣一條有效的榦擾序列,位于291～311 bp,成功構建錶達載體,COX-2在蛋白水平的錶達明顯被抑製.結論 利用化學閤成siRNA進行初篩,再構建shRNA錶達載體,可快速實現目的基因的錶達抑製.
목적 연구응용RNA간우기술진행억제위암SGC-7901세포COX-2적표체연구.방법 의거siRNA설계원칙,침대인COX-2적Mrna서렬,설계병합성3조21 bp적쌍련RNA,순시전염인위암세포SGC-7901,Western인적t험증기인침묵효솔이사선합괄적siRNA서렬;근거사선출적유효서렬,합성편마단발잡RNA적쌍련과핵감산,정향극륭도함유U6 RNA취합매Ⅲ계동자적pSilencerTM2.1-U6 neo진핵표체재체,은정전염위암세포SGC-7901중,경G418사선,획득극륭세포.결과 사선출일조유효적간우서렬,위우291～311 bp,성공구건표체재체,COX-2재단백수평적표체명현피억제.결론 이용화학합성siRNA진행초사,재구건shRNA표체재체,가쾌속실현목적기인적표체억제.
