中华微生物学和免疫学杂志
中華微生物學和免疫學雜誌
중화미생물학화면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF MICROBIOLOGY AND IMMUNOLOGY
2003年
12期
982-984
,共3页
蒋黎华%史桂英%石学耕%范丽安
蔣黎華%史桂英%石學耕%範麗安
장려화%사계영%석학경%범려안
MHCⅠ类分子%肽%竞争结合试验
MHCⅠ類分子%肽%競爭結閤試驗
MHCⅠ류분자%태%경쟁결합시험
目的建立弱酸处理后荧光素标记肽竞争结合法分析MHCⅠ类分子抗原呈递能力的方法,并评估其实用性.方法pH2.7～3.1的柠檬酸缓冲液对B淋巴母细胞进行短时处理后,即用IMDM培养液中和pH,然后加入β2微球蛋白、荧光素标记的9肽及竞争肽共同孵育,FACs检测细胞表面的平均荧光强度,以达到50%抑制所需的竞争肽浓度作为衡量竞争肽与MHC分子结合能力的指标.结果通过不同pH的柠檬酸缓冲液处理、处理后不同时间加β2微球蛋白和/或荧光素标记肽、加入不同稀释度的竞争肽等角度,对方法进行评估,结果显示本方法操作简便、结果可靠、非特异性吸附小.结论在排除其它MHCⅠ类分子的干扰后,本方法适合在国情条件下广泛开展MHCⅠ类分子抗原呈递能力及T细胞肽表位筛选等研究.
目的建立弱痠處理後熒光素標記肽競爭結閤法分析MHCⅠ類分子抗原呈遞能力的方法,併評估其實用性.方法pH2.7～3.1的檸檬痠緩遲液對B淋巴母細胞進行短時處理後,即用IMDM培養液中和pH,然後加入β2微毬蛋白、熒光素標記的9肽及競爭肽共同孵育,FACs檢測細胞錶麵的平均熒光彊度,以達到50%抑製所需的競爭肽濃度作為衡量競爭肽與MHC分子結閤能力的指標.結果通過不同pH的檸檬痠緩遲液處理、處理後不同時間加β2微毬蛋白和/或熒光素標記肽、加入不同稀釋度的競爭肽等角度,對方法進行評估,結果顯示本方法操作簡便、結果可靠、非特異性吸附小.結論在排除其它MHCⅠ類分子的榦擾後,本方法適閤在國情條件下廣汎開展MHCⅠ類分子抗原呈遞能力及T細胞肽錶位篩選等研究.
목적건립약산처리후형광소표기태경쟁결합법분석MHCⅠ류분자항원정체능력적방법,병평고기실용성.방법pH2.7～3.1적저몽산완충액대B림파모세포진행단시처리후,즉용IMDM배양액중화pH,연후가입β2미구단백、형광소표기적9태급경쟁태공동부육,FACs검측세포표면적평균형광강도,이체도50%억제소수적경쟁태농도작위형량경쟁태여MHC분자결합능력적지표.결과통과불동pH적저몽산완충액처리、처리후불동시간가β2미구단백화/혹형광소표기태、가입불동희석도적경쟁태등각도,대방법진행평고,결과현시본방법조작간편、결과가고、비특이성흡부소.결론재배제기타MHCⅠ류분자적간우후,본방법괄합재국정조건하엄범개전MHCⅠ류분자항원정체능력급T세포태표위사선등연구.
