病毒学报
病毒學報
병독학보
CHINESE JOURNAL OF VIROLOGY
2004年
4期
315-321
,共7页
周小云%刘颖%饶力群%王芙%戴凯凡%段丹丽%邵一鸣
週小雲%劉穎%饒力群%王芙%戴凱凡%段丹麗%邵一鳴
주소운%류영%요력군%왕부%대개범%단단려%소일명
痘苗病毒%载体%重组痘苗病毒%选择标记
痘苗病毒%載體%重組痘苗病毒%選擇標記
두묘병독%재체%중조두묘병독%선택표기
为构建适用于疫苗株筛选的痘苗病毒载体,利用标记瞬时稳定的原理,在痘苗病毒单选择标记载体psc65的基础上,构建成带有neo和LacZ双选择标记的痘苗病毒载体pVI75.为检验载体pVI75的有效性,将HIV-1合成基因syngpnef插入到载体pVI75上,构建成转移质粒pVI75-syngpnef,并与天坛株752-1痘苗病毒共转染CEF细胞.筛选得到的重组病毒经PCR和Dot blot检验表明,标记基因已被删除,而目的基因被整合到痘苗病毒基因组上.Westem blot检测结果表明,目的基因的表达正确.痘苗病毒载体pVI75的构建使得疫苗株筛选的工作量大为降低,时间大大缩短,为利用痘苗病毒载体构建重组病毒疫苗株的研究提供了参考.
為構建適用于疫苗株篩選的痘苗病毒載體,利用標記瞬時穩定的原理,在痘苗病毒單選擇標記載體psc65的基礎上,構建成帶有neo和LacZ雙選擇標記的痘苗病毒載體pVI75.為檢驗載體pVI75的有效性,將HIV-1閤成基因syngpnef插入到載體pVI75上,構建成轉移質粒pVI75-syngpnef,併與天罈株752-1痘苗病毒共轉染CEF細胞.篩選得到的重組病毒經PCR和Dot blot檢驗錶明,標記基因已被刪除,而目的基因被整閤到痘苗病毒基因組上.Westem blot檢測結果錶明,目的基因的錶達正確.痘苗病毒載體pVI75的構建使得疫苗株篩選的工作量大為降低,時間大大縮短,為利用痘苗病毒載體構建重組病毒疫苗株的研究提供瞭參攷.
위구건괄용우역묘주사선적두묘병독재체,이용표기순시은정적원리,재두묘병독단선택표기재체psc65적기출상,구건성대유neo화LacZ쌍선택표기적두묘병독재체pVI75.위검험재체pVI75적유효성,장HIV-1합성기인syngpnef삽입도재체pVI75상,구건성전이질립pVI75-syngpnef,병여천단주752-1두묘병독공전염CEF세포.사선득도적중조병독경PCR화Dot blot검험표명,표기기인이피산제,이목적기인피정합도두묘병독기인조상.Westem blot검측결과표명,목적기인적표체정학.두묘병독재체pVI75적구건사득역묘주사선적공작량대위강저,시간대대축단,위이용두묘병독재체구건중조병독역묘주적연구제공료삼고.
