中国生物制品学杂志
中國生物製品學雜誌
중국생물제품학잡지
CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS
2005年
1期
1-4
,共4页
张爱华%端义坤%闭兰%赵亚杰%张智%阎莹%王志友%余模松
張愛華%耑義坤%閉蘭%趙亞傑%張智%閻瑩%王誌友%餘模鬆
장애화%단의곤%폐란%조아걸%장지%염형%왕지우%여모송
免疫噬菌体展示Fab抗体库%筛选%噬菌体ELISA%序列
免疫噬菌體展示Fab抗體庫%篩選%噬菌體ELISA%序列
면역서균체전시Fab항체고%사선%서균체ELISA%서렬
目的从自建的免疫噬菌体展示Fab抗体库中获得抗乙型肝炎病毒表面抗原Fab抗体分子,并进行基因序列分析.方法采用纯化的乙型肝炎病毒表面抗原作为包被抗原,对自建的4×105Fab噬菌体抗体库进行富集筛选,从阳性强的次级库中挑选单个克隆菌,分别进行噬菌体ELISA、PCR和限制性内切酶鉴定后,再选取三者均为阳性的克隆菌进行基因序列分析.结果共挑选了60个单克隆菌株,其中噬菌体ELISA阳性有27个,阳性率为45%;PCR鉴定均为相应大小片段;限制性内切酶鉴定表明27个阳性克隆菌中有13个具有约1 500 bp的片段,其余均为约750 bp大小;BstOI酶切鉴定表明各克隆菌的酶切方式不同;选取5个含约1 500 bp片段和2个含约750 bp片段的克隆菌株,经测序均为人免疫球蛋白基因,且重链分别属于VH3、VH4、VH5家族,轻链分别属于L5、L6、L8和012/02家族.结论从自建的免疫噬菌体展示Fab抗体库中成功地获得了抗乙型肝炎病毒表面抗原Fab抗体分子.表明所构建的抗乙型肝炎病毒表面抗原的Fab抗体库的抗体基因具有多样性.
目的從自建的免疫噬菌體展示Fab抗體庫中穫得抗乙型肝炎病毒錶麵抗原Fab抗體分子,併進行基因序列分析.方法採用純化的乙型肝炎病毒錶麵抗原作為包被抗原,對自建的4×105Fab噬菌體抗體庫進行富集篩選,從暘性彊的次級庫中挑選單箇剋隆菌,分彆進行噬菌體ELISA、PCR和限製性內切酶鑒定後,再選取三者均為暘性的剋隆菌進行基因序列分析.結果共挑選瞭60箇單剋隆菌株,其中噬菌體ELISA暘性有27箇,暘性率為45%;PCR鑒定均為相應大小片段;限製性內切酶鑒定錶明27箇暘性剋隆菌中有13箇具有約1 500 bp的片段,其餘均為約750 bp大小;BstOI酶切鑒定錶明各剋隆菌的酶切方式不同;選取5箇含約1 500 bp片段和2箇含約750 bp片段的剋隆菌株,經測序均為人免疫毬蛋白基因,且重鏈分彆屬于VH3、VH4、VH5傢族,輕鏈分彆屬于L5、L6、L8和012/02傢族.結論從自建的免疫噬菌體展示Fab抗體庫中成功地穫得瞭抗乙型肝炎病毒錶麵抗原Fab抗體分子.錶明所構建的抗乙型肝炎病毒錶麵抗原的Fab抗體庫的抗體基因具有多樣性.
목적종자건적면역서균체전시Fab항체고중획득항을형간염병독표면항원Fab항체분자,병진행기인서렬분석.방법채용순화적을형간염병독표면항원작위포피항원,대자건적4×105Fab서균체항체고진행부집사선,종양성강적차급고중도선단개극륭균,분별진행서균체ELISA、PCR화한제성내절매감정후,재선취삼자균위양성적극륭균진행기인서렬분석.결과공도선료60개단극륭균주,기중서균체ELISA양성유27개,양성솔위45%;PCR감정균위상응대소편단;한제성내절매감정표명27개양성극륭균중유13개구유약1 500 bp적편단,기여균위약750 bp대소;BstOI매절감정표명각극륭균적매절방식불동;선취5개함약1 500 bp편단화2개함약750 bp편단적극륭균주,경측서균위인면역구단백기인,차중련분별속우VH3、VH4、VH5가족,경련분별속우L5、L6、L8화012/02가족.결론종자건적면역서균체전시Fab항체고중성공지획득료항을형간염병독표면항원Fab항체분자.표명소구건적항을형간염병독표면항원적Fab항체고적항체기인구유다양성.
