武汉大学学报(理学版)
武漢大學學報(理學版)
무한대학학보(이학판)
JOURNAL OF WUHAN UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2006年
4期
481-486
,共6页
赵金梅%朱菁萍%王锋%周明%赵开弘
趙金梅%硃菁萍%王鋒%週明%趙開弘
조금매%주정평%왕봉%주명%조개홍
C-藻蓝蛋白%藻蓝蛋白β脱辅基蛋白%裂合酶基因cpeS%体内重组
C-藻藍蛋白%藻藍蛋白β脫輔基蛋白%裂閤酶基因cpeS%體內重組
C-조람단백%조람단백β탈보기단백%렬합매기인cpeS%체내중조
为研究藻蓝蛋白β亚基的生物合成途径,通过构建相容的3种重组质粒pET-cpcB(C155I)、pCDFDuet-cpeS和pACYCDuet-ho1-pcyA,将裂合酶基因 cpeS 、血红素氧化酶基因 ho 1、藻蓝胆素合成酶基因 pcyA 和藻蓝蛋白β脱辅基蛋白基因 cpcB (C155I)共同转入大肠杆菌.通过色素蛋白锌电泳和光谱检测,结果表明产生了有生物活性的CpcB(C155I)-PCB.而在裂合酶基因 cpeS 不转入大肠杆菌的情况下,大肠杆菌内只有7.6%的CpcB(C155I)-PCB产生.实现了大肠杆菌内藻蓝蛋白β亚基84位半胱氨酸残基与PCB连接,为进一步在大肠杆菌内合成天然的藻蓝蛋白奠定了基础.
為研究藻藍蛋白β亞基的生物閤成途徑,通過構建相容的3種重組質粒pET-cpcB(C155I)、pCDFDuet-cpeS和pACYCDuet-ho1-pcyA,將裂閤酶基因 cpeS 、血紅素氧化酶基因 ho 1、藻藍膽素閤成酶基因 pcyA 和藻藍蛋白β脫輔基蛋白基因 cpcB (C155I)共同轉入大腸桿菌.通過色素蛋白鋅電泳和光譜檢測,結果錶明產生瞭有生物活性的CpcB(C155I)-PCB.而在裂閤酶基因 cpeS 不轉入大腸桿菌的情況下,大腸桿菌內隻有7.6%的CpcB(C155I)-PCB產生.實現瞭大腸桿菌內藻藍蛋白β亞基84位半胱氨痠殘基與PCB連接,為進一步在大腸桿菌內閤成天然的藻藍蛋白奠定瞭基礎.
위연구조람단백β아기적생물합성도경,통과구건상용적3충중조질립pET-cpcB(C155I)、pCDFDuet-cpeS화pACYCDuet-ho1-pcyA,장렬합매기인 cpeS 、혈홍소양화매기인 ho 1、조람담소합성매기인 pcyA 화조람단백β탈보기단백기인 cpcB (C155I)공동전입대장간균.통과색소단백자전영화광보검측,결과표명산생료유생물활성적CpcB(C155I)-PCB.이재렬합매기인 cpeS 불전입대장간균적정황하,대장간균내지유7.6%적CpcB(C155I)-PCB산생.실현료대장간균내조람단백β아기84위반광안산잔기여PCB련접,위진일보재대장간균내합성천연적조람단백전정료기출.