世界华人消化杂志
世界華人消化雜誌
세계화인소화잡지
WORLD CHINESE JOURNAL OF DIGESTOLOGY
2007年
12期
1417-1420
,共4页
徐世平%吴本俨%王孟薇%高利利%伍银桥%蒋立新%王卫华%尤纬缔
徐世平%吳本儼%王孟薇%高利利%伍銀橋%蔣立新%王衛華%尤緯締
서세평%오본엄%왕맹미%고리리%오은교%장립신%왕위화%우위체
胃癌%GCRG213基因%腺相关病毒%siRNA%基因转染
胃癌%GCRG213基因%腺相關病毒%siRNA%基因轉染
위암%GCRG213기인%선상관병독%siRNA%기인전염
目的:构建一个表达胃癌相关基因GCRG213小干扰RNA的重组腺相关病毒载体,制备能靶向性抑制GCRG213表达的重组腺相关病毒.方法:将构建好并经验证的包含胃癌相关基因GCRG21 3特异性小干扰RNA片段GCRG213-RNAi-2的IMG800-GCRG213i-2质粒用BamH Ⅰ+BglⅡ双酶切,回收410 bp左右目的片段,将pSNAV2.0质粒用BamH Ⅰ单酶切后同目的片段连接,经酶切和测序鉴定后,用新建质粒脂质体转染BHK-21细胞,G418筛选后大规模培养,再用辅助病毒HSVl-rc/△UL2感染,获取病毒.结果:成功构建包含U6启动子和胃癌相关基因GCRG213特异性RNA干扰片段的重组腺相关病毒载体,并制备出滴度为5×1012 vectorgenome/L高滴度腺相关病毒.结论:载体的构建为进一步研究GCRG213的体内功能打下了基础,也将为更多的基因干预和基因的功能研究提供有效的工具.
目的:構建一箇錶達胃癌相關基因GCRG213小榦擾RNA的重組腺相關病毒載體,製備能靶嚮性抑製GCRG213錶達的重組腺相關病毒.方法:將構建好併經驗證的包含胃癌相關基因GCRG21 3特異性小榦擾RNA片段GCRG213-RNAi-2的IMG800-GCRG213i-2質粒用BamH Ⅰ+BglⅡ雙酶切,迴收410 bp左右目的片段,將pSNAV2.0質粒用BamH Ⅰ單酶切後同目的片段連接,經酶切和測序鑒定後,用新建質粒脂質體轉染BHK-21細胞,G418篩選後大規模培養,再用輔助病毒HSVl-rc/△UL2感染,穫取病毒.結果:成功構建包含U6啟動子和胃癌相關基因GCRG213特異性RNA榦擾片段的重組腺相關病毒載體,併製備齣滴度為5×1012 vectorgenome/L高滴度腺相關病毒.結論:載體的構建為進一步研究GCRG213的體內功能打下瞭基礎,也將為更多的基因榦預和基因的功能研究提供有效的工具.
목적:구건일개표체위암상관기인GCRG213소간우RNA적중조선상관병독재체,제비능파향성억제GCRG213표체적중조선상관병독.방법:장구건호병경험증적포함위암상관기인GCRG21 3특이성소간우RNA편단GCRG213-RNAi-2적IMG800-GCRG213i-2질립용BamH Ⅰ+BglⅡ쌍매절,회수410 bp좌우목적편단,장pSNAV2.0질립용BamH Ⅰ단매절후동목적편단련접,경매절화측서감정후,용신건질립지질체전염BHK-21세포,G418사선후대규모배양,재용보조병독HSVl-rc/△UL2감염,획취병독.결과:성공구건포함U6계동자화위암상관기인GCRG213특이성RNA간우편단적중조선상관병독재체,병제비출적도위5×1012 vectorgenome/L고적도선상관병독.결론:재체적구건위진일보연구GCRG213적체내공능타하료기출,야장위경다적기인간예화기인적공능연구제공유효적공구.
