西安交通大学学报(医学版)
西安交通大學學報(醫學版)
서안교통대학학보(의학판)
JOURNAL OF XI'AN JIAOTONG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2008年
4期
379-382
,共4页
申萍香%吴璇%黄江%胡旭初%余新炳%包怀恩%廖兴江
申萍香%吳璇%黃江%鬍旭初%餘新炳%包懷恩%廖興江
신평향%오선%황강%호욱초%여신병%포부은%료흥강
亚洲牛带绦虫%延伸因子-1%基因克隆%原核表达
亞洲牛帶縚蟲%延伸因子-1%基因剋隆%原覈錶達
아주우대조충%연신인자-1%기인극륭%원핵표체
目的 对亚洲牛带绦虫成虫延伸因子-1(elongation factor 1,EF-1)基因进行克隆、表达和免疫学初步研究.方法 将亚洲牛带绦虫成虫EF-1克隆到原核表达质粒pET-28a(+)中,在大肠杆菌BL-21/DE3中用异丙硫代-β-D半乳糖苷诱导表达,表达产物通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)进行鉴定,用镍离子金属螯合剂亲和层析柱进行纯化,用蛋白印迹法(Western blotting)进行免疫学分析.结果 PCR、双酶切及DNA测序结果 均表明重组质粒pET-28a(+)-EF-1构建成功.重组蛋白可被感染了亚洲牛带绦虫患者血清和猪血清识别,表明其具有免疫反应性.结论 亚洲牛带绦虫成虫EF-1基因可在原核表达系统中获得具有免疫学活性的表达,为进一步研究该蛋白的功能奠定了基础.
目的 對亞洲牛帶縚蟲成蟲延伸因子-1(elongation factor 1,EF-1)基因進行剋隆、錶達和免疫學初步研究.方法 將亞洲牛帶縚蟲成蟲EF-1剋隆到原覈錶達質粒pET-28a(+)中,在大腸桿菌BL-21/DE3中用異丙硫代-β-D半乳糖苷誘導錶達,錶達產物通過十二烷基磺痠鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)進行鑒定,用鎳離子金屬螯閤劑親和層析柱進行純化,用蛋白印跡法(Western blotting)進行免疫學分析.結果 PCR、雙酶切及DNA測序結果 均錶明重組質粒pET-28a(+)-EF-1構建成功.重組蛋白可被感染瞭亞洲牛帶縚蟲患者血清和豬血清識彆,錶明其具有免疫反應性.結論 亞洲牛帶縚蟲成蟲EF-1基因可在原覈錶達繫統中穫得具有免疫學活性的錶達,為進一步研究該蛋白的功能奠定瞭基礎.
목적 대아주우대조충성충연신인자-1(elongation factor 1,EF-1)기인진행극륭、표체화면역학초보연구.방법 장아주우대조충성충EF-1극륭도원핵표체질립pET-28a(+)중,재대장간균BL-21/DE3중용이병류대-β-D반유당감유도표체,표체산물통과십이완기광산납-취병희선알응효전영(SDS-PAGE)진행감정,용얼리자금속오합제친화층석주진행순화,용단백인적법(Western blotting)진행면역학분석.결과 PCR、쌍매절급DNA측서결과 균표명중조질립pET-28a(+)-EF-1구건성공.중조단백가피감염료아주우대조충환자혈청화저혈청식별,표명기구유면역반응성.결론 아주우대조충성충EF-1기인가재원핵표체계통중획득구유면역학활성적표체,위진일보연구해단백적공능전정료기출.
